"EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細胞系 細胞背景資料:腹水瘤 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞 D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞 Human Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞 細胞生長:貼壁 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞 Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 T 98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74Int細胞、MLA144細胞、MPC-83細胞 MUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞 KHYG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates 1B細胞、OVCAR8/ADR細胞、H2172細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細胞系 細胞生長特性:半貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞 BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞 GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞 NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞 NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞 118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞 Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞 BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞 NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細胞系 OV-CA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞 FO [Mouse myeloma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞 3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞 NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞 NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞 HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞 HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞 DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞 18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞 UM-UC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞 Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞 CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞 NCI-H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞 OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞 KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞 SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞 H-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637細胞、SKNBE細胞、GB-1細胞 PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞 H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞 H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞 MSTO211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細胞、SUM-159PT細胞、CATH-a細胞 NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞 NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞 NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞 AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞 Epstein-Barr-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞 High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞 KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞 B-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞 BC-3-H-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞 UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞 CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞 Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞 TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞 Hs-729-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細胞、OCILY-10細胞、MM96L細胞 MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞 SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞 TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞 PC3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMx721.174.T2細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞、Hs839.T細胞 NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞 NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞 ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞 Verda reno細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞 L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞 HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞 AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞 RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞 BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞 EAC-E2G8 epithelioid cells小鼠腹水瘤細胞系 Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞 A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細胞、Granta519細胞、LC-MS細胞 H-1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細胞、NCIH1048細胞、Hs675T細胞 GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細胞、Institute for Medical Research-32細胞、HCC366細胞 "
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