"HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
細胞背景資料：轉(zhuǎn)移性小葉乳腺癌；胸腔積液轉(zhuǎn)移；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
MES-SA Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
KP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832.Tc細胞、PAa細胞、NRCC細胞
細胞生長：貼壁
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SLK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
FHs 74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL1細胞、H-510細胞、HEC-251細胞
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
H-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細胞、SW527細胞、HCC4006細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
P30/Ohkubo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
CX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
H2.35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
Nb-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
TGW細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
CEM-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
SKMEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
LMH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞
NH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
HT1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：190PT細胞、MKN1細胞、A-375細胞
WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
GM 2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
H-1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
NCI-H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
PCI-4M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
CAL 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
WSU-DLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
HCC2185 epithelioid cells人乳腺轉(zhuǎn)移性小葉癌細胞系
HEK-AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB-1細胞、PC3M-2B4細胞、HT-3細胞
BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細胞、MDAMB175細胞、SCL I細胞
Baby Hamster Kidney-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC-11細胞、OCI-AML-3細胞、H196細胞
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