"B35 epithelioid cells大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；BDIX
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
IR983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92細胞、32D clone 3細胞、EL-4細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
細胞生長：貼壁
B35 epithelioid cells大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Oka-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細胞、NCI-H322細胞、HHFK細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
Hs 604.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細胞、L(TK-)細胞、U266-B1細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
B35 epithelioid cells大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞
MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF178C細胞、HGC-27細胞、KPL1細胞
751-NA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO27細胞、HeLa.S3細胞、138MG細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
B35 epithelioid cells大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
Tca-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細胞、NCI-H1648細胞、NCI-H1355細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞
MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞
HIEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04679細胞、SW1573細胞、RPMI2650細胞
WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
RL-952細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta TC6細胞、TE671細胞、CCRF/CEM/0細胞
C-8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞
B35 epithelioid cells大鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細胞、526-mel細胞、GFP-Olig2細胞
NCIH358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO-1細胞、MLE 12細胞、UACC812細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細胞、CAL-62細胞、HLE B-3細胞
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