"K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：骨肉瘤；肺轉(zhuǎn)移；雌性；BALB/c
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
SUP-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 7951細(xì)胞、Hep-G2細(xì)胞、SKLMS1細(xì)胞
MV522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SNU-739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-498細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞、AM-38細(xì)胞
SUM190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞、SCC15細(xì)胞
HO1N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Case 3細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞
MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞
Panc02.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細(xì)胞、U118MG細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
HASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE 85細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞、OCI Ly1細(xì)胞
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞系
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
TEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、LM3細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
UMNSAH/DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM-460細(xì)胞、NCIH1666細(xì)胞、H-1993細(xì)胞
CEM-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞
CEM-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 468細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞
C32 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA-DX5細(xì)胞、C1R細(xì)胞、NGEC細(xì)胞
MBVP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-16細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞
GM00346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細(xì)胞、BT474細(xì)胞、HFL-1細(xì)胞
UMNSAH-DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞
IEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-EBNA細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞、ME-180細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
NCIH838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞
KLN 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
HuPT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細(xì)胞、Loucy細(xì)胞、SJSA1細(xì)胞
NB-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-125細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞、HT clone H9細(xì)胞
SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞
D 407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 15細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞、ECC12細(xì)胞
hOMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細(xì)胞、JM-1細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
Tj-905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH 3細(xì)胞、COLO678細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞
Karpas422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細(xì)胞、Hepa 1-6細(xì)胞、W133細(xì)胞
HCC1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA420細(xì)胞、GM03569細(xì)胞、COV-434細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞
NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞
SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
HS-294-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAEC1-KT細(xì)胞、TC-1[JHU-1]細(xì)胞、TALL1細(xì)胞
N1E115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞
H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
WEHI-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞、SW-900細(xì)胞
K7M2-WT epithelioid cells小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞系
Panc 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47-D細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞、Pan02細(xì)胞
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、GA10細(xì)胞
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細(xì)胞、N2a細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、RT112細(xì)胞
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