"KYSE-180 epithelioid cells人食管鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:食管鱗癌;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞 Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞 Hs578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10 RGB細(xì)胞、A427細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 KYSE-180 epithelioid cells人食管鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒(méi)有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 TE15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-Tera-2細(xì)胞、PAEC細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞 OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞 TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞 Calu3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細(xì)胞、CV1細(xì)胞、TM3細(xì)胞 HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 KYSE-180 epithelioid cells人食管鱗癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞 Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞 RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞 TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞 P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞 HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞 AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞 H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞 RBMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRTEC細(xì)胞、Hs 729細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞 MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞 KYSE-180 epithelioid cells人食管鱗癌細(xì)胞系 SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞 SUP T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-325細(xì)胞、MT-2細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞 Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞 M2-10B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞、H522細(xì)胞 AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞 MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞 MDA MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細(xì)胞、MX1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞 Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCLY8細(xì)胞、HCC-15細(xì)胞、HPAF細(xì)胞 OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞 J82COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MES 1細(xì)胞、P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、SJCRH30細(xì)胞 UPCISCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC133細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、138 MG細(xì)胞 HCC1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細(xì)胞、NGEC細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞 293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞 50.B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞 H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞 Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞 SW 839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細(xì)胞、TT細(xì)胞、FU-97細(xì)胞 RL-952細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞、BEND細(xì)胞、TE3A細(xì)胞 NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞 4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞 TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞 SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞 H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞 BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞 CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞 TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞 NCI N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞、NCIH208細(xì)胞 Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞 HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-401細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞、NCIH378細(xì)胞 MOLM-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細(xì)胞、Sol8細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞 EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞 MDA-MB-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2444細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、HS-729細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞 VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞 SKMEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone 3細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、RGC6細(xì)胞 BT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細(xì)胞、H-1694細(xì)胞、MC-4細(xì)胞 RCC_7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞 Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞 Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞 H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞 A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞 COS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞 Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞 NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞 UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞 Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞 KMB17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細(xì)胞、CNE-2Z細(xì)胞、801-D細(xì)胞 Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞 NS1-Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL2細(xì)胞、MDA-MB-175細(xì)胞、BHK細(xì)胞 KYSE-180 epithelioid cells人食管鱗癌細(xì)胞系 D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞 EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、CT26細(xì)胞 CEM.C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細(xì)胞、H87細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞 RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、COLO 206F細(xì)胞 "
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