"SG231 epithelioid cells人膽管上皮癌細胞系

細胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌；男性

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。

BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞

COLO 320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞

WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞

細胞生長：貼壁

SG231 epithelioid cells人膽管上皮癌細胞系

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞

LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞

OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞

H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞

NCI-H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

SG231 epithelioid cells人膽管上皮癌細胞系

細胞生長特性：貼壁

細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書

細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。

Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞

Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞

EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞

NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞

H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞

MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞

HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞

EFM-192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞

HcaF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞

NCI-H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞

SG231 epithelioid cells人膽管上皮癌細胞系

LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞

Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞

K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞

RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞

NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞

NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞

Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞

IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞

CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞

HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞

Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞

Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞

PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞

NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞

aTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407 RPE細胞、NCTC 1469細胞、4T1細胞

M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞

Walker-256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞

BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞

IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞

Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞

SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞

VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞

NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞

OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞

Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞

OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞

MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞

H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞

28SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-ESF-1細胞、HEC1A細胞、COLO201細胞

MDA-MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細胞、NCI-H727細胞、2780CP細胞

RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞

H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞

HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞

H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞

OCILY19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB 1.19細胞、NCIH2029細胞、Walker-256細胞

LPC-H12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞

SW-1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞

L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞

HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞

16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞

MDCK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞

KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞

Mouse Forestomach Carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細胞、GM00346B細胞、Capan-1細胞

SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞

G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞

FHs74 Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細胞、Med 283細胞、LO2細胞

293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞

LS 1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、LY細胞、OVCA 433細胞

TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞

H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞

SG231 epithelioid cells人膽管上皮癌細胞系

NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞

PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB1 Lu細胞、WI 38細胞、CCD 841 CoN細胞

LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD 18細胞、High 5細胞、HL-1細胞

EFM-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMES細胞、D-407細胞、Colon 38細胞

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