"MCA-205 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：纖維肉瘤
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
U-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細(xì)胞、TE-12細(xì)胞、McArdle RH-7777細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
MCA-205 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Vero E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細(xì)胞、T84細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞
Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞
MDA 231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、Ca761細(xì)胞、H719細(xì)胞
D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MCA-205 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
H-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-661細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞
H35 Reuber細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞、RN細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞
H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細(xì)胞、PTK2細(xì)胞、EB2細(xì)胞
HOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98 G細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞、SW962細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
MCA-205 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
ACC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞、OC-316細(xì)胞
H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細(xì)胞、PTK2細(xì)胞、EB2細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
NCIH209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細(xì)胞、Capan 1細(xì)胞、VE細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
HCC1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2細(xì)胞、OVCA-433細(xì)胞、A-673細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞
hRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細(xì)胞、LSECs細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞
ECGI10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細(xì)胞、BDCM細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞
BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞
TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞
HCPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞
MF2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞、SU.86細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
HCPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
CD 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞、PBMC細(xì)胞
TGBC-11-TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
HuH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細(xì)胞、LC1細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
CHO-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM-2細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞、KMB17細(xì)胞
SK-BR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-74細(xì)胞、DMS-114細(xì)胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞
TMD8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細(xì)胞、H-1915細(xì)胞、SNU387細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞
EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞
NCI-H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA433細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞、OsACL細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
TM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
JIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
NCI-HUT-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細(xì)胞、H322T細(xì)胞、SUDHL4細(xì)胞
MCA-205 epithelioid cells小鼠纖維肉瘤細(xì)胞系
3T3J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC2細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
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