"TFK-1 epithelioid cells人膽管癌細胞系 細胞背景資料:膽管癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。 H-2444細胞系相關產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 H-1437細胞系相關產(chǎn)品:H-64細胞、L02細胞、PA-TU S細胞 CCC-HPF-1細胞系相關產(chǎn)品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞 細胞生長:貼壁 TFK-1 epithelioid cells人膽管癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PANC403細胞系相關產(chǎn)品:MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞 WBF344細胞系相關產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞 OE-19細胞系相關產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞 CCK81細胞系相關產(chǎn)品:HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞 Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 TFK-1 epithelioid cells人膽管癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 LO2細胞系相關產(chǎn)品:IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞 H510細胞系相關產(chǎn)品:OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞 Y3.AG.1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞 NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品:SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞 Bowes melanoma cells細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞 OSK-1細胞系相關產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞 H-1395細胞系相關產(chǎn)品:A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞 HBMEC細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞 NCI-H28細胞系相關產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞 ONS76細胞系相關產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞 TFK-1 epithelioid cells人膽管癌細胞系 K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞 HEK293-A細胞系相關產(chǎn)品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞 UCH-1細胞系相關產(chǎn)品:RCC10RGB細胞、LA-N-5細胞、H1944細胞 C81-61細胞系相關產(chǎn)品:JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞 CCC-ESF-1細胞系相關產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞 Detroit562細胞系相關產(chǎn)品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞 Detroit562細胞系相關產(chǎn)品:NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞 NCM-460細胞系相關產(chǎn)品:H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞 LS-174T細胞系相關產(chǎn)品:H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞 NL20細胞系相關產(chǎn)品:RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞 Hep3B細胞系相關產(chǎn)品:P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞 MHCC97-H細胞系相關產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞 NCI-SNU-886細胞系相關產(chǎn)品:SJSA-1細胞、MGC-803細胞、R 2 C細胞 NCIH1395細胞系相關產(chǎn)品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞 Hs-688A-T細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP.FGC細胞、ANA1細胞、HTR-8/SV-neo細胞 HEP-3B2細胞系相關產(chǎn)品:CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞 NCI-H1792細胞系相關產(chǎn)品:MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞 P3-X63.Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞 L23/P細胞系相關產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞 Mel RM細胞系相關產(chǎn)品:MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞 Cates 1B細胞系相關產(chǎn)品:KP2細胞、67NR細胞、A549細胞 HCC-2935細胞系相關產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞 JM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞 K-1735細胞系相關產(chǎn)品:786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞 hTERT-RPE-1細胞系相關產(chǎn)品:SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞 3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞 RTMC細胞系相關產(chǎn)品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞 Balb/c 3T3細胞系相關產(chǎn)品:ACCM細胞、NRK細胞、TOV-21G細胞 NCIH209細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞 CoCL3細胞系相關產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞 U266細胞系相關產(chǎn)品:MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞 H-1568細胞系相關產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞 BC-3-H-I細胞系相關產(chǎn)品:CHP126細胞、Lewis Lung細胞、NBL-3細胞 Raji細胞系相關產(chǎn)品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞 NCI-H1568細胞系相關產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞 A-72細胞系相關產(chǎn)品:MDA-157細胞、aTC1 Clone 6細胞、NU-GC-4細胞 HDLM2細胞系相關產(chǎn)品:HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞 H1341細胞系相關產(chǎn)品:T47D:A細胞、TE354.T細胞、H-1666細胞 H-920細胞系相關產(chǎn)品:JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞 253J細胞系相關產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞 PCI:SG231細胞系相關產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞 NCI-H2291細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞 SK-GT-4細胞系相關產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞 H650細胞系相關產(chǎn)品:K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞 CTLL2細胞系相關產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞 UCW 100細胞系相關產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞 P30-OHK細胞系相關產(chǎn)品:MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞 WEHI-279細胞系相關產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞 RINm5F細胞系相關產(chǎn)品:AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞 TFK-1 epithelioid cells人膽管癌細胞系 GBCSD細胞系相關產(chǎn)品:Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞 hTERT RPE1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8226細胞、K562/ADR細胞、SKNBE(2)細胞 HCC-1395細胞系相關產(chǎn)品:SCaBER細胞、SK-N-BE-2c細胞、MUGCHOR1細胞 Y3.AG.1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細胞、C-4 I細胞、T241細胞 "
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