"PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞系
細胞背景資料：胚胎；成纖維細胞
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
SKNBE(2c)細胞系相關產(chǎn)品：Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
KYSE-510細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
SW-1222細胞系相關產(chǎn)品：SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞
細胞生長：貼壁
PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MDA MB 175 VII細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
NIH:OVCAR-4細胞系相關產(chǎn)品：HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞
MCCAR細胞系相關產(chǎn)品：TGHAVSMC細胞、U266 B1細胞、H1437細胞
SNU601細胞系相關產(chǎn)品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
L 428細胞系相關產(chǎn)品：SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
MLFC細胞系相關產(chǎn)品：Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞
RASMC細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
SK-N-DZ細胞系相關產(chǎn)品：A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
MESSADX5細胞系相關產(chǎn)品：MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
PLC細胞系相關產(chǎn)品：Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產(chǎn)品：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
HEC-251細胞系相關產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
BALL1細胞系相關產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
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HEC-251細胞系相關產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
EoL-1 cell細胞系相關產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
HBE 135-E6/E7細胞系相關產(chǎn)品：FHL-124細胞、SCC 9細胞、HPMC細胞
L-02細胞系相關產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
NCI-H647細胞系相關產(chǎn)品：HCCLM6細胞、SPC-A-1細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞
NB-19細胞系相關產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
SJ-RH30細胞系相關產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
OKT3細胞系相關產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
JVM3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
MDA436細胞系相關產(chǎn)品：UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
SK-GT-2細胞系相關產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
PK-136細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
Hs-852-T細胞系相關產(chǎn)品：U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞
RPMI1846細胞系相關產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
MOLT3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞
CX1細胞系相關產(chǎn)品：RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞
SK HEP-1細胞系相關產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
U-226AR1細胞系相關產(chǎn)品：H-1417細胞、U-937細胞、WML2細胞
HUCEC細胞系相關產(chǎn)品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
SNU354細胞系相關產(chǎn)品：NCI522細胞、PK (15)細胞、BN-CL2細胞
OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
OK-WT細胞系相關產(chǎn)品：BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
Opossum Kidney細胞系相關產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
Jurkat-77細胞系相關產(chǎn)品：Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
OE19細胞系相關產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產(chǎn)品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
SNU484細胞系相關產(chǎn)品：Hs819T細胞、NCIH64細胞、OV-2008細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
COR L279細胞系相關產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
QSG-7701細胞系相關產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
NK10a細胞系相關產(chǎn)品：HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
VE細胞系相關產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞
H-2291細胞系相關產(chǎn)品：SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
BEL-7402細胞系相關產(chǎn)品：5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
L-M(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
SLK細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
KPL4細胞系相關產(chǎn)品：GT1-1細胞、WML2細胞、ABC1細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
T1-73細胞系相關產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
HRPEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
Anip[973]細胞系相關產(chǎn)品：B16BL6細胞、WTRL1細胞、293-EBNA細胞
DoTc2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞
HN13細胞系相關產(chǎn)品：16-HBEo細胞、B16 F10細胞、R 1610細胞
SK-MEL-2細胞系相關產(chǎn)品：SNU638細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞、CCD 841 CoN細胞
PMVEC細胞系相關產(chǎn)品：BC3H1細胞、FM-88細胞、RMS1598細胞
HCC-1833細胞系相關產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
PG13 epithelioid cells逆轉(zhuǎn)錄病毒包被的TK-NIH3T3細胞系
HSC 3細胞系相關產(chǎn)品：P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
VE細胞系相關產(chǎn)品：GC-2spd(ts)細胞、ID8細胞、CCD 966 SK細胞
KYSE 140細胞系相關產(chǎn)品：KU19-19細胞、HCC1954-BL細胞、PC3細胞
Mv.1.Lu細胞系相關產(chǎn)品：YAC細胞、YES 2細胞、UWB1-289細胞
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