"NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:經(jīng)典小細(xì)胞肺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 32Dcl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞 EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞 CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SKG IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞 Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞 HPB/ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細(xì)胞、H-1299細(xì)胞、HGBEC細(xì)胞 CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞 WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞 PA I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637H細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞、EU-2細(xì)胞 NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞 SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞 SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞 UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞 VE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細(xì)胞、LM3細(xì)胞、EA.Hy926細(xì)胞 MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞 HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞 A-375細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細(xì)胞、A.704細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞 LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞 H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞 C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞 FHL-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL3細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞 NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞 NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞 BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞 NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞 KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞 CAL-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW837細(xì)胞、WIL2 Secreting細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞 H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞 MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞 WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞 JM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞 alpha-TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 522細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞、Leydig細(xì)胞 Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞 IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞 HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞 MCF-7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6.1細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞 ACC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-8細(xì)胞、GM637細(xì)胞、EFO27細(xì)胞 ARO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞、A375.S2細(xì)胞 624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞 PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIII細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞 JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞 H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞 KFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC-1細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞、TK-10細(xì)胞 RPMI #1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細(xì)胞、HSC4細(xì)胞、HS578T細(xì)胞 NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞 CAL851細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA 47細(xì)胞、SNU216細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞 RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞 P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞 OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞 HIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細(xì)胞、GP2d細(xì)胞、SF 763細(xì)胞 H-1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞 CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞 JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞 T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞 KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞 Metastatic Variant 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞 Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞 KRC Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L540細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞、McG-1細(xì)胞 CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞 JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞 M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1385細(xì)胞、RKO細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞 U-138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細(xì)胞、HNSC細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞 Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞 AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞 KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞 OVCA 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES2細(xì)胞、NT-2細(xì)胞、HOC細(xì)胞 LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞 NCI-H187 epithelioid cells人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞 Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細(xì)胞、RAG細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞 H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞 NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 "
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