"FL83B epithelioid cells小鼠正常肝細胞系 細胞背景資料:肝;自發(fā)永生;C57BL/6J 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞 H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞 HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞 細胞生長:貼壁 FL83B epithelioid cells小鼠正常肝細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴(yán)重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞 HCT/FU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞 U20S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP-293細胞、HNE-1細胞、GA-10(Clone 4)細胞 FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 FL83B epithelioid cells小鼠正常肝細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞 LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞 HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞 HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞 OV433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMO6細胞、SH-SY5Y細胞、RSC96細胞 CHO Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/BBe細胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、A375S2細胞 Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞 OVCAR 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM/S細胞、Ball 1細胞、JIMT細胞 Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞 FL83B epithelioid cells小鼠正常肝細胞系 NS-20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞 MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 H-220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞 VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞 JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞 NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞 NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞 NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞 Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞 WM-239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞 BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞 95-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞 H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞 IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞 SK-Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 683細胞、KYSE 140細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞 EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞 SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞 Pt K2 (NBL-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞 RL95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞 HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞 CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞 IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞 PTK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞 P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞 RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞 EFM192B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞 HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞 NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞 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