"JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:精原瘤;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞 HFF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞、HCC827細(xì)胞 DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MN-9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細(xì)胞、BT549細(xì)胞、H-2405細(xì)胞 TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞 FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞 A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞 MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 NCI-H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細(xì)胞、OV3121細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞 NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞 ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞 HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞 EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞 ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞 HCC 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC1469細(xì)胞、Ku812細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞 16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞 HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞 LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細(xì)胞系 C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞 SUIT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1735細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞 FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞 DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞 HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞 OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞 OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞 130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞 COS7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、HR1K細(xì)胞、Vx2細(xì)胞 AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞 FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞 Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞 SPC-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細(xì)胞、BC-024細(xì)胞、751細(xì)胞 OVCAR-8/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞 NT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細(xì)胞、CT 26細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞 746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞 SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞 KPL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT1-1細(xì)胞、WML2細(xì)胞、ABC1細(xì)胞 HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞 TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞 OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞 KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞 hEM15A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2591細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞、M-14細(xì)胞 MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞 HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞 Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞 FO [Mouse myeloma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/Fujioka細(xì)胞、Colo16細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞 HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞 C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞 KALS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH209細(xì)胞、2BS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞 B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞 SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞 OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞 SEG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞 OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞 Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞 Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞 HuH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C7細(xì)胞、4-1st細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞 Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞 CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞、RAEC細(xì)胞 WM2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞 Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞 PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞 LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞 THP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR420細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞、High Five細(xì)胞 HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞 KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞 SHI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24(ECV304)細(xì)胞、C32r細(xì)胞、A 172細(xì)胞 IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞 NCIH82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞 JKT-1 epithelioid cells人精原瘤細(xì)胞系 Colon-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細(xì)胞、PM6細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞 OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細(xì)胞、A-253細(xì)胞、FAT細(xì)胞 ARPE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoCL3細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、H1944細(xì)胞 "
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