"LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系 細胞背景資料:肺癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞 High Five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN-205細胞、SW-48細胞、D-341細胞 KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞 細胞生長:貼壁 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞 Panc-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC3細胞、LC-2 ad細胞、MARC-145細胞 MCF-10 Attached細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細胞、E6-1細胞、RL952細胞 C2BBe1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細胞、GT39細胞、HPAF2細胞 HEK-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞 Caov-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細胞、LUDLU 1細胞、SUM-52細胞 HMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細胞、SKGT4細胞、QGP 1細胞 SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞 H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞 OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞 CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞 HCC-1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞 SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞 5-8F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852細胞、TE1細胞、NCI-H1417細胞 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系 293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞 NCIH2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞 SHP77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細胞、PFSK細胞、TE-10細胞 RKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞 CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞 JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞 JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞 UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞 HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞 SW-780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細胞、Kasumi 1細胞、ID8細胞 Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞 PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞 MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞 WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞 H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞 UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞 P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞 Adeno 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞 LED-WiDr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVOG細胞、H1404細胞、ARO-81細胞 LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞 MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞 MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞 H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細胞、LC-2-Ad細胞、SkChA1細胞 PL9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細胞、CAKI1細胞、MDA-MB-231-GFP細胞 BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞 RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞 Natural Killer-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞 MDA-MB-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞 Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞 MLMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞 IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞 HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞 MOLP-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞 NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞 MRC-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞 hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞 BT325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY細胞、J82細胞、HuH7細胞 D283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞、Det 562細胞 HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞 Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞 Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞 Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞 SN12PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞 CMT.64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞 MDA231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細胞、Leukemia L1210細胞、HCT-FET細胞 USMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT7細胞、Hs 840.T細胞、HEK-293-F細胞 WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞 HOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98 G細胞、HSC-2細胞、SW962細胞 RPMI #8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 LA-795 epithelioid cells小鼠肺腺癌細胞系 Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞 U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細胞、MC-3T3細胞、VMM5細胞 B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ketr 3細胞、KYSE 30細胞、Leukemic 1210細胞 HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、LU-65M細胞、SKNBE(2c)細胞 "
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