"CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肺血管；內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細(xì)胞先脫落，對腫瘤細(xì)胞來說，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
SCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1092細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞、Colo699細(xì)胞
HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞
1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NG10815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHK細(xì)胞、B78細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞
NCI-H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞
293-GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
U118細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞
Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞
HeLa229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM-1細(xì)胞、CA-46細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞
H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB細(xì)胞、NCI-H2171細(xì)胞、CP70細(xì)胞
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
NCIH847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPM2細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞、H23細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
F442-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細(xì)胞、DH 82細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞
RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞
HSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-596細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞
Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
SW 480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c 3T3細(xì)胞、CAL120細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
CL-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-3細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞、NG108-15細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
DLM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFH細(xì)胞、U-343細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞
OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-173細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞
T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞
GM03573A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞
SUM-159-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細(xì)胞、SW1271細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞
Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
HPAFII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞
Y3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
QGY7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞
NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞
TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞
BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
BC3H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細(xì)胞、OC 316細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
COC1/CDDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
CPA 47 epithelioid cells牛肺血管內(nèi)皮細(xì)胞系
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
Hep-G2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細(xì)胞、CHO Lec1細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞
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