"HepaRG epithelioid cells人肝癌細胞系
細胞背景資料：肝癌；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
SNU251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 513細胞、L-Wnt-3A細胞、AN3-CA細胞
Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
細胞生長：貼壁
HepaRG epithelioid cells人肝癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥Ｎ艺務(wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞
HCT-8/V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DR2R 1610細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、TCCSUP細胞
NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
FRTL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細胞、OCI/AML-5細胞、NS1-Ag 4/1細胞
HRIF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MCF-10A細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HepaRG epithelioid cells人肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞
QGY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1112sk細胞、IPLB-SF-21細胞、HCC-4006細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
DAN-G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
HepaRG epithelioid cells人肝癌細胞系
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
Kuramochi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞
GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
AHH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOTO細胞、DKMG細胞、NCI-HUT-596細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
Hut292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
Mel-RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞
NCI-H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
Hs 445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
NCI-SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-441細胞、MKN 28細胞、MHCC97-L細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
CFSC-8B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、ACC-2細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
ZR75_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細胞、CCC-ESF-1細胞、RPMI 2650細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
GMK,BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細胞、HEK-AD293細胞、HARA-B細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
HepaRG epithelioid cells人肝癌細胞系
211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細胞、LN 382細胞、MHH-CALL2細胞
TE3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細胞、AdHek細胞、CoCL3細胞
ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細胞、V 79-4細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
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