"CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細胞系 細胞背景資料:結(jié)腸癌;C57BL/ICRF 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞 MOLM-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI N87細胞、Sol8細胞、WEHI3B細胞 Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞 細胞生長:貼壁 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細胞、TCMK-1細胞、H810細胞 HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞 MDCKII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞 V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞 MDA.MB.435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細胞、PCI-4.2細胞、Liver-02細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。 H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞 OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞 NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞 H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞 HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞 SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞 Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞 HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞 B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞 UMUC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細胞系 HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞 LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞 IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞 HEK 293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞 U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞 U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞 HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞 DCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細胞、KMS-26細胞、DU_145細胞 Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞 Hs 737.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞 KE-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs706T細胞、SUP-B1細胞、T47D:A細胞 SUM159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞 MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞 HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞 CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞 PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞 HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞 HCC-2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞 HRA-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞 U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞 MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞 A704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞 293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞 LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞 Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞 HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞 LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞 MDA-MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 453細胞、A375S2細胞、U-343MG細胞 SVEC4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細胞、CORL88細胞、Hs 729.T細胞 159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞 Panc_02_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞 MCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞 COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞 REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞 WM115mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞 PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞 SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞 SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞 MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞 PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞 Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞 L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞 HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞 MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞 U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細胞、NUGC-4細胞、H-1395細胞 293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞 Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞 PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞 MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞 CMT93 epithelioid cells小鼠結(jié)腸癌細胞系 Buffalo Rat Liver-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細胞、Hs940.T細胞、Verda reno細胞 H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細胞、WM266-4細胞、HCT-8/V細胞 DMS53細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca-Ski細胞、GM00637F細胞、CV-1.K細胞 NCI-H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL-68細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Huh 7.5.1細胞 "
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