"SCL-II epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系 細胞背景資料:皮膚鱗癌;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞 THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞 CCRF CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞 細胞生長:貼壁 SCL-II epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞 Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞 BALB/3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-ori細胞、RC-2細胞、LS-174細胞 C57/B6-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs611T細胞、CCD-112CoN細胞、P3 88 D1細胞 Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SCL-II epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞 LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞 HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞 SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞 SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞 NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞 CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞 MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞 SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞 WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞 SCL-II epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系 MEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞 HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞 U031細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細胞、NCIH1385細胞、CCF-STTG1細胞 Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞 MC-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞 COLO-824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞 KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞 HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞 H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞 HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞 T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞 HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞 JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞 MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞 CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞 BTI-TN5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞 H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞 NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞 NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞 UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞 HMC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞 H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞 PK15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞 MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞 NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞 TOV21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞 VE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2spd(ts)細胞、LM3細胞、EA.Hy926細胞 Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞 HO8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞 R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞 MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞 NW-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細胞、BEAS-2B細胞、Mevo細胞 SKMEL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-20細胞、GC-2spd(ts)細胞、BAC1.2F5細胞 SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞 NBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞、KU19-19細胞 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞 Clone Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞 OCI-AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞 H-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSU-Pr1細胞、TGBC-11-TKB細胞、HEp-2細胞 SKNO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細胞、IEC-18細胞、C32 [Human melanoma]細胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞 H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞 Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細胞、SNU-449細胞、U266 B1細胞 H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞 COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞 COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞 NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞 SCL-II epithelioid cells人皮膚鱗癌細胞系 RERF-LCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1882細胞、MAntle cell VERona-1細胞、BLO-11細胞 BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、U-373MG ATCC細胞、TOV21細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、COLO320HSR細胞、GBC-SD細胞 HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細胞、BXPC3細胞、NIH-3T3細胞 "
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