"CAL-51 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞背景資料:乳腺癌;胸腔積液轉(zhuǎn)移;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! TE354T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞 H69/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mo 59J細胞、SNU-1040細胞、HFT-8810細胞 PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞 細胞生長:貼壁 CAL-51 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H-2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-39細胞、SBC-5細胞、C4 I細胞 L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞 U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞 NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞 H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 CAL-51 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞 CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞 BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞 KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞 H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞 HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞 HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞 NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞 DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞 CAL-51 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 CCD18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE B-3細胞、NCI-H1385細胞、HBL 100細胞 TE 354.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞 SUM 52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞 RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞 SW-48細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞 VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞 Y3-Ag123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞 MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞 MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞 CII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞 JM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI No. 1846細胞、Clone Y-1細胞、H7721細胞 BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞 Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞 SDBMSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞 RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞 MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞 L02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細胞、NCI-H1435細胞、B958細胞 KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞 NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞 HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞 EJ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Functional Liver Cell-7細胞、FHCRC subclone 11細胞、Cor L88細胞 HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞 RC92A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細胞、CCC-HEH-2細胞、HUT 125細胞 H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞 Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞 P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞 MRC 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細胞、PE CA PJ34細胞、RC-4B細胞 MN-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien133細胞、H-838細胞、HCC1599細胞 H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞 HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 HCEC-B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AX-Mel細胞、MNNG細胞、H-1975細胞 MH-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞 TGBC11TKB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞 H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞 CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞 MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞 HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞 SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞 Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞 624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞 H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細胞、MBVP細胞、MGH-U3 (RN)細胞 HNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞 MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞 870細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞 Pa017C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細胞、CWR22Rv1細胞、Li-7細胞 MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞 LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞 IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞 CAL-51 epithelioid cells人乳腺癌細胞系 HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、TCMK-1細胞、OCI AML2細胞 Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、OVCAR-3細胞、alphaTC clone 6細胞 BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細胞、HT115細胞、Hs 739.T細胞 "
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