"T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:食管;上皮細(xì)胞;女性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞 U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞 NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KU 812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞 GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞 786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞 SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞 GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞 LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞 NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細(xì)胞、TALL1細(xì)胞、H-226細(xì)胞 BIC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1563細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞 HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞 Neuro2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DKMG細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞、H-1651細(xì)胞 GH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細(xì)胞、HCT15細(xì)胞、293T細(xì)胞 SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞 BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞 Tissue Culture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞、WC00059細(xì)胞 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細(xì)胞系 CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞 SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞 HG2855細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P116細(xì)胞、H-735細(xì)胞、MLE-12細(xì)胞 MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞 Chinese Hamster Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細(xì)胞、PNT1-a細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞 PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞 Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞 Cloudman M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dami細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞、H1650細(xì)胞 NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞 MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞 NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞 FRO 81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE1細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞 SKOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞 SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞 TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞 AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞 SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞 SNU-398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細(xì)胞、LICR-HN-6細(xì)胞、NF639細(xì)胞 KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞 EFM192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞、LS411N細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞 GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞 JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞、RC92A細(xì)胞 SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞 KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞 Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞 OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞 HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 4細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞、H2052細(xì)胞 KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞 CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞 H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞 RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞 MCA-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN 1細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞 ST 486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞、BMF細(xì)胞 SK-RC 42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 13細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞、USMC細(xì)胞 JM-Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK-1細(xì)胞、TE85細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞 HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞 L-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC116細(xì)胞、TW-039細(xì)胞、NCI-H1755細(xì)胞 H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞 ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞 HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞 HCC1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細(xì)胞、3T6細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞 Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞 EHEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-270細(xì)胞、SK-N-DZ細(xì)胞、Rh30細(xì)胞 CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞 MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞 RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞 NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞 HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞 A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞 T-HEECs epithelioid cells人正常食管上皮細(xì)胞系 BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞 FTC133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞 LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細(xì)胞、T98G細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞 NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞 "
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