"WSU-HN13 epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 細胞背景資料:舌鱗癌;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術。目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質濃度增高,pH值改變,部分蛋白質由于上述原因而變性,引起細胞內部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內容物丟失。如果細胞內冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內水分,減少細胞內冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內的水分滲出細胞外,減少胞內形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 NGP細胞系相關產品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞 HepG2/C3A細胞系相關產品:SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞 KRC/Y細胞系相關產品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞 細胞生長:貼壁 WSU-HN13 epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SGC996細胞系相關產品:HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞 P3-x63-Ag8 653細胞系相關產品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞 HN6細胞系相關產品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞 WM-239A細胞系相關產品:KYSE 410細胞、BRL-3A細胞、Mel-624細胞 RK-13細胞系相關產品:CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 WSU-HN13 epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳;血清使用錯誤或血清的品質不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉速是根據相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉軸中心與離心套管底部內壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉數;RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數來表示單位。 kms 11細胞系相關產品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞 HEK-AD293細胞系相關產品:KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞 HCC1806細胞系相關產品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞 RA-FLSs細胞系相關產品:HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞 H2291細胞系相關產品:RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞 OKT3細胞系相關產品:TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞 OVCA 432細胞系相關產品:YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞 HUC細胞系相關產品:FK81細胞、HuT78細胞、OSK-1細胞 NCI-SNU-5細胞系相關產品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 THEECs細胞系相關產品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞 WSU-HN13 epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 GOTO細胞系相關產品:MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞 SW-1222細胞系相關產品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞 SKLU01細胞系相關產品:WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞 IOSE 80細胞系相關產品:H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞 Panc327細胞系相關產品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關產品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關產品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 GM05862細胞系相關產品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞 HSC-4細胞系相關產品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞 Metastatic Variant 522細胞系相關產品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞 Panc_02_03細胞系相關產品:OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞 Cloudman M3細胞系相關產品:Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞 WI-38細胞系相關產品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞 95-D細胞系相關產品:Line 870 Emory University-4細胞、SHP77細胞、SCI1細胞 HCE細胞系相關產品:HEC-1-A細胞、SMA560細胞、LUDLU-1細胞 HPAF-I細胞系相關產品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞 Karpas-422細胞系相關產品:Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞 HC-11細胞系相關產品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞 OCI-Ly 7細胞系相關產品:H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞 SKMel-28細胞系相關產品:Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞 293 H細胞系相關產品:RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞 CAMA-1細胞系相關產品:Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞 TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關產品:NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞 3T3J2細胞系相關產品:UMRC2細胞、CAL-39細胞、HEK-293-FT細胞 P3X63細胞系相關產品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞 P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產品:2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞 hTERT-RPE細胞系相關產品:NPA'87細胞、MEG-01細胞、Adeno-293細胞 SW 982細胞系相關產品:Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞 GM03320D細胞系相關產品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞 DHL6細胞系相關產品:KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞 SK-MES-1細胞系相關產品:NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞 NCIH23細胞系相關產品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞 SNU761細胞系相關產品:NCIH1694細胞、H1755細胞、Bac 1.2F5細胞 COLO 320細胞系相關產品:THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞 TE-85細胞系相關產品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞 SKMEL-24細胞系相關產品:MDA-134細胞、AE 1201細胞、MV4II細胞 NCI H2106細胞系相關產品:IPLB-SF-21細胞、Human podocyte細胞、TE671/RD細胞 PLA 802細胞系相關產品:MCF-7ADR細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、MGH-UI細胞 TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞系相關產品:NCI-1155細胞、H-2052細胞、Panc05.04細胞 Panc08.13細胞系相關產品:PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞 BN-CL2細胞系相關產品:SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞 10T1/2細胞系相關產品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞 SNB-19細胞系相關產品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞 CMT-93細胞系相關產品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞 HLE-B3細胞系相關產品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞 3T3-A31細胞系相關產品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞 BV-2細胞系相關產品:SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞 U-87細胞系相關產品:LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞 Huh7.5.1細胞系相關產品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞 OCI-AML-2細胞系相關產品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞 RMS1598細胞系相關產品:NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞 WSU-HN13 epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 NCI-H510A細胞系相關產品:G-292 clone A141B1細胞、H209細胞、CL1.0細胞 HCM細胞系相關產品:HEK-AD293細胞、LU165細胞、IBRS2細胞 OV1-P細胞系相關產品:H740細胞、HEK-293H細胞、EU-2細胞 HCC-1806細胞系相關產品:D324 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