"SSP-25 epithelioid cells人肝膽管癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:肝內(nèi)膽管癌;女性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞 Hs 274.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU.812細(xì)胞、HECV細(xì)胞、NCIH23細(xì)胞 WM-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1944細(xì)胞、MHHCALL2細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 SSP-25 epithelioid cells人肝膽管癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個實驗室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞 Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞 SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞 MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞 HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SSP-25 epithelioid cells人肝膽管癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 HuTu-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞 ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞 TE-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞 HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞 50.B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞 AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞 COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞 SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2817細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞、MDA231細(xì)胞 P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞 SSP-25 epithelioid cells人肝膽管癌細(xì)胞系 H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-250細(xì)胞、211H細(xì)胞、BE2C細(xì)胞 IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞 SBC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞 MN9D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251n細(xì)胞、Vero from pool #76細(xì)胞、HAPI細(xì)胞 SCC25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-940細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞 Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞 Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞 GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞 A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞 HPBALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞、3T3-F442A細(xì)胞 LTEP-sm 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-6細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞、SNU-475細(xì)胞 RDES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 78細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、C-Lu-65細(xì)胞 Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞 P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細(xì)胞、NCI.H460細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞 IM 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 J2細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞 OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THPI細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞 YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞 SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞 P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞 JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞 KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞 Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞 OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞 MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞 Swiss/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞 NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞 RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞 CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞 OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞 JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞 MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL28細(xì)胞、HN6細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞 NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞、ESC細(xì)胞 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539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞 NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞 COS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞 3AO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細(xì)胞、H711細(xì)胞、RN細(xì)胞 RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞 C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞 SSP-25 epithelioid cells人肝膽管癌細(xì)胞系 SKMES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-04B細(xì)胞、MDBK細(xì)胞、GES1細(xì)胞 SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細(xì)胞、GC-1spg細(xì)胞、ARH77細(xì)胞 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、GI-1細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、COLO320HSR細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞 "
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