"NSC-34 epithelioid cells鼠神經(jīng)元細胞系 細胞背景資料:神經(jīng)元 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 KASUMI6細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1435細胞、OCI/AML-3細胞、RMG1細胞 ARO81-1細胞系相關產(chǎn)品:IBRS2細胞、Bowes melanoma cells細胞、CoCL2細胞 EFM-192B細胞系相關產(chǎn)品:NCIH548細胞、CEK細胞、Hs 578T細胞 細胞生長:貼壁 NSC-34 epithelioid cells鼠神經(jīng)元細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Strain V細胞系相關產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞 GES1細胞系相關產(chǎn)品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞 Hs1.Tes細胞系相關產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞 130-T細胞系相關產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞 SUD-4細胞系相關產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NSC-34 epithelioid cells鼠神經(jīng)元細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 NFHIOSE-29細胞系相關產(chǎn)品:NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞 FU-OV-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞 HFLS細胞系相關產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞 LNCaP clone FGC細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞 T98細胞系相關產(chǎn)品:SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞 NCIH1435細胞系相關產(chǎn)品:CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞 Panc_04_03細胞系相關產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞 HuT102細胞系相關產(chǎn)品:PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞 VM-CUB-I細胞系相關產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞 L615細胞系相關產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞 NSC-34 epithelioid cells鼠神經(jīng)元細胞系 NCI.H226細胞系相關產(chǎn)品:HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞 OVCAR 5細胞系相關產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞 Y3-Ag 1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞 RSC 96細胞系相關產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞 SUM-102細胞系相關產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 SUM 52細胞系相關產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞 NCIH508細胞系相關產(chǎn)品:UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞 NIH:OVCAR-4細胞系相關產(chǎn)品:HTori:3細胞、HLE-B3細胞、ECC-1細胞 3T3細胞系相關產(chǎn)品:Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞 NH6細胞系相關產(chǎn)品:MonoMac6細胞、WERI細胞、HDQ-P1細胞 RMC細胞系相關產(chǎn)品:NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞 PG-BE1細胞系相關產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞 KU-812細胞系相關產(chǎn)品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞 D-283細胞系相關產(chǎn)品:NP69細胞、NCIH2023細胞、Vero-E6細胞 TE 85.T細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞 SF295細胞系相關產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞 T/GHA-VSMC細胞系相關產(chǎn)品:SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞 SW-1088細胞系相關產(chǎn)品:CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞 NE1細胞系相關產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞 N9細胞系相關產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產(chǎn)品:HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞 Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品:FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞 RPMI 7951細胞系相關產(chǎn)品:X63.Ag8.653細胞、BEAS 2B細胞、SU-DHL-4細胞 MLOY4細胞系相關產(chǎn)品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞 HPAF2細胞系相關產(chǎn)品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞 VMCUB-1細胞系相關產(chǎn)品:Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞 P3/NS1/Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品:2008細胞、AA-Mel細胞、SMMC-7721細胞 HLEB-3細胞系相關產(chǎn)品:MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞 HT144mel細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞 OCI-Ly 3細胞系相關產(chǎn)品:32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞 N87細胞系相關產(chǎn)品:HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞 UACC 893細胞系相關產(chǎn)品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞 NCIH740細胞系相關產(chǎn)品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 hTERT-HPNE細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 HFTF細胞系相關產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞 W256細胞系相關產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞 H-889細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 P3X63Ag8細胞系相關產(chǎn)品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞 HEK 293-H細胞系相關產(chǎn)品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞 SDBMSC細胞系相關產(chǎn)品:hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞 32D:cl3細胞系相關產(chǎn)品:Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞 UMUC3細胞系相關產(chǎn)品:JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞 SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品:786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞 CCD33Co細胞系相關產(chǎn)品:T-47D細胞、U118-MG細胞、Leukemia L1210細胞 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