"WM115 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:黑色素瘤;女性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 52PE細胞系相關產(chǎn)品:Panc04.03細胞、BT-20細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞 MRMT-1細胞系相關產(chǎn)品:HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞 LIM1215細胞系相關產(chǎn)品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞 細胞生長:貼壁 WM115 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結構變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PC-3M細胞系相關產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細胞、NCIH128細胞、8226/S細胞 HEK293S細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞 CPA47細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞 Panc 8.13細胞系相關產(chǎn)品:BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞 NUGC3細胞系相關產(chǎn)品:VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 WM115 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 RBL-2H3細胞系相關產(chǎn)品:EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞 HS-940-T細胞系相關產(chǎn)品:Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞 Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞 Vero-E6細胞系相關產(chǎn)品:LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞 DI TNC1細胞系相關產(chǎn)品:H-2172細胞、HREC細胞、ATDC5細胞 A-704細胞系相關產(chǎn)品:CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞 MDA MB 175 VII細胞系相關產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞 H-2196細胞系相關產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞 CZ-1細胞系相關產(chǎn)品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 Hs 294T細胞系相關產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞 WM115 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 GES-1細胞系相關產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞 KP-N-RT細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 Hs888 Lu細胞系相關產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞 KMH-2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly1細胞、SJRH-30細胞、aTC1 Clone 6細胞 IALM細胞系相關產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 IALM細胞系相關產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞 SVG p12細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞 U-373MG ATCC細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞 HIEC細胞系相關產(chǎn)品:Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞 Glioma 261細胞系相關產(chǎn)品:A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞 NCIH2452細胞系相關產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞 H-1568細胞系相關產(chǎn)品:HKC細胞、Me Wo細胞、NP69SV40T細胞 FHs74Int細胞系相關產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞 C-Lu65細胞系相關產(chǎn)品:MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞 UMUC1細胞系相關產(chǎn)品:HLE細胞、HFL-1細胞、H-2029細胞 AR4-2J細胞系相關產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞 HFE-145細胞系相關產(chǎn)品:VSMC細胞、H1876細胞、T 84細胞 SW-1783細胞系相關產(chǎn)品:FRhK4細胞、CHOK1細胞、U14細胞 C-33 A細胞系相關產(chǎn)品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞 SUP-T1細胞系相關產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞 U87-MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞 LSECs細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 HOS-MNNG細胞系相關產(chǎn)品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞 NCI N87細胞系相關產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞 GM17346細胞系相關產(chǎn)品:A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞 P31FUJ細胞系相關產(chǎn)品:DHL-16細胞、ME1細胞、FU-OV-1細胞 293-F細胞系相關產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞 Wien-133細胞系相關產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 TK-10細胞系相關產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞 Hs-695-T細胞系相關產(chǎn)品:H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞 74Int細胞系相關產(chǎn)品:RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞 SUM149-PT細胞系相關產(chǎn)品:MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞 NMCG-1細胞系相關產(chǎn)品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞 LNT-229細胞系相關產(chǎn)品:H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞 EVSA/T細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞 H1404細胞系相關產(chǎn)品:He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞 HNE-2細胞系相關產(chǎn)品:KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞 HuH-1細胞系相關產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞 Z310細胞系相關產(chǎn)品:NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞 WM239A細胞系相關產(chǎn)品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞 RK-13細胞系相關產(chǎn)品:CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞 PIGI細胞系相關產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞 HBdSMC細胞系相關產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞 Neuro2a細胞系相關產(chǎn)品:DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞 HUT 125細胞系相關產(chǎn)品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞 COLO320-DM細胞系相關產(chǎn)品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞 NCIH1435細胞系相關產(chǎn)品:CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞 CNE2Z細胞系相關產(chǎn)品:LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞 QBC(939)細胞系相關產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞 Huh-7細胞系相關產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞 WM115 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 MODE-K細胞系相關產(chǎn)品:RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞 GM00215細胞系相關產(chǎn)品:OS-RC-2細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、G-292, clone A141B1細胞 BJAB細胞系相關產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SNU368細胞、EL 4細胞 Human Embryonic Skin細胞系相關產(chǎn)品:BeWo細胞、A2008細胞、H1105細胞 "
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