"MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：睪丸間質(zhì)瘤
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開(kāi)。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專(zhuān)用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見(jiàn)，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
SW 403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL_S細(xì)胞、4T1-LUC細(xì)胞、A375細(xì)胞
U-2OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細(xì)胞、OLN93細(xì)胞、NS653細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒(méi)有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺(jué)得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒(méi)有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞
HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性，也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長(zhǎng)，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等；用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S16細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
BEL 7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo205細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞
BE2_C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細(xì)胞、HN4細(xì)胞、AE1201細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
CCK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細(xì)胞、IOSE29細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞
MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞系
X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細(xì)胞、H-196細(xì)胞、SHIN3細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE細(xì)胞、TOV-21G細(xì)胞、H-2107細(xì)胞
1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
LAN-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞
CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
SNU-638細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T4細(xì)胞、VeroC1008細(xì)胞、Anip[973]細(xì)胞
TSU-Pr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1568細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
KTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226細(xì)胞、UMC11細(xì)胞、A 375細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞
Hep II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1581細(xì)胞、Anglne細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
N9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KB細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞
LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞
U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞
SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細(xì)胞、H-82細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞
SR-786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-4細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞
OVCAR 432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞、HEI193細(xì)胞
MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAMC82細(xì)胞、Hs 729T細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞
C32 [Human melanoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細(xì)胞、WC00097細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞
H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞
SW 1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
BJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞、T241細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
HepG2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞、JKT1細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC-1細(xì)胞、COV-362細(xì)胞、EAhy 926細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞系
H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細(xì)胞、NS653細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs27F細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
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