"MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質細胞瘤細胞系 細胞背景資料:睪丸間質瘤 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 SW 403細胞系相關產品:NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞 U-2OS細胞系相關產品:RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞 BBE細胞系相關產品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞 細胞生長:貼壁 MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質細胞瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KG1細胞系相關產品:BE2M17細胞、U-87MG ATCC細胞、Hs 766T細胞 HUC-1細胞系相關產品:NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞 KE39細胞系相關產品:HFT8810細胞、ChaGo K-1細胞、HBE 135-E6/E7細胞 LN229細胞系相關產品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞 A9 (Hamprecht)細胞系相關產品:HLF細胞、CFSC-2G細胞、HEK293S細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質細胞瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 BEL-7405細胞系相關產品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 MH-22a細胞系相關產品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞 HOS細胞系相關產品:S16細胞、COLO680N細胞、MIA-PaCa-2細胞 HK-2 [Human kidney]細胞系相關產品:University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞 BEL 7404細胞系相關產品:Colo205細胞、JiyoyeP-2003細胞、HIMEC細胞 Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關產品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞 GM05887A細胞系相關產品:MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞 BE2_C細胞系相關產品:SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞 H341細胞系相關產品:MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞 CCK81細胞系相關產品:HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞 MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質細胞瘤細胞系 X63-Ag8.653細胞系相關產品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞 LY細胞系相關產品:H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞系相關產品:HPDE細胞、TOV-21G細胞、H-2107細胞 1.1B4細胞系相關產品:LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞 PLC細胞系相關產品:Hs739T細胞、RPMI-1788細胞、OVCA-432細胞 P560細胞系相關產品:HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞 P560細胞系相關產品:HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞 Potorous tridactylus Kidney 2細胞系相關產品:KYSE30細胞、RCC 7860細胞、Farage細胞 MV4:11細胞系相關產品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞 CF-1 MEF細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞 LAN-5細胞系相關產品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞 CWR22Rv1細胞系相關產品:NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞 LS-1034細胞系相關產品:NCI-H2107細胞、OsACL細胞、A 549細胞 PLA-802細胞系相關產品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞 SNU-638細胞系相關產品:Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞 TSU-Pr1細胞系相關產品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞 Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關產品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞 KTC-1細胞系相關產品:RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞 BALB/3T3 cl. A31細胞系相關產品:RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞 MFE 280細胞系相關產品:C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞 Hep II細胞系相關產品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞 COV 504細胞系相關產品:HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞 Mino細胞系相關產品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞 TE-32細胞系相關產品:P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞 CHL-CL-11細胞系相關產品:AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞 N9細胞系相關產品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞 LIM 1215細胞系相關產品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞 U-251 MG細胞系相關產品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞 SNU-C2B細胞系相關產品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞 A-172細胞系相關產品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞 CaSki細胞系相關產品:HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞 SR-786細胞系相關產品:OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞 MDA468細胞系相關產品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞 COV-362細胞系相關產品:BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞 Hs-343-T細胞系相關產品:FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞 CTV1細胞系相關產品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞 VA-ES-BJ細胞系相關產品:SK-Col-1細胞、SW480細胞、H.Ep. No. 2細胞 Rca-B細胞系相關產品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞 OVCAR 432細胞系相關產品:ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞 MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞 C32 [Human melanoma]細胞系相關產品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞 H1770細胞系相關產品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞 SW 1353細胞系相關產品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 NCI-SNU-5細胞系相關產品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 BJ1細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞 CAL-39細胞系相關產品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞 WI-38細胞系相關產品:RD細胞、LMTK-細胞、OCI-AML3細胞 HepG2細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞 H1563細胞系相關產品:GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞 Alpha Mouse Liver 12細胞系相關產品:KTC-1細胞、COV-362細胞、EAhy 926細胞 Verda reno細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、H9c2(2-1)細胞、KG1A細胞 MLTC-1 epithelioid cells小鼠睪丸間質細胞瘤細胞系 H-847細胞系相關產品:Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞 RCCJF細胞系相關產品:HSC-1細胞、NS653細胞、NIH3T3-L1細胞 H-187細胞系相關產品:Hs27F細胞、EC-GI細胞、GM03671C細胞 HOS-TE85細胞系相關產品:SkMel31細胞、HUV-EC-C細胞、Tregs細胞 "
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