"QGP-1 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
細胞背景資料:胰腺癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
細胞生長:貼壁
QGP-1 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
H-378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
QGP-1 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
DSL-6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
MDA-MB-435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
REC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-7細胞、HEMCSS細胞、CEM clone 7細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
QGP-1 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
SUM-149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細胞、HMEC-1細胞、KYSE-150細胞
Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
50.B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21G細胞、WIL2 S細胞、SW579細胞
HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
SKHEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
JVM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
B 95.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
TO 175.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞
H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細胞、NCIH1694細胞、H-676細胞
SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
H82sclc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
UACC 893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
B16BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
HCC1419細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
OCI-Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
SUM 159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
MV-4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細胞、FHs74 Int細胞、H-1755細胞
MESSADX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
RIN-14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
HuCCT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98細胞、AR-42J細胞、RPMI1788細胞
KYSE 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
QGP-1 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
H-920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JVM3細胞、SNU475細胞、NCIH2052細胞
GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細胞、NCIH1944細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 205細胞、H2141細胞、H-524細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA435細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、Mv1Lu細胞
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