"MuM-2B epithelioid cells人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:脈絡(luò)膜黑色素瘤;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
MuM-2B epithelioid cells人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
Lu-99A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8細(xì)胞、HPAF II細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
RINm5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細(xì)胞、U138MG細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞
HLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC細(xì)胞、D10G41細(xì)胞、NB4細(xì)胞
RPMI-1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MuM-2B epithelioid cells人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
HS-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1438細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞、ChaGo-K-1細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
SW13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1436細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
MuM-2B epithelioid cells人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞系
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
P-388D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞
hRPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0504細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞
Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞
HFF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞、P3.653細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
NK92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞、N1S1細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
BNL CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF1細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞、Colo-206F細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
EA.Hy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1770細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞、P36細(xì)胞
KTA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞、HOS細(xì)胞
FDCP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞
SkChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細(xì)胞、Human ErythroLeukemia細(xì)胞、H-211細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞
HUC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞、TE-12細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
NG 108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569B細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞、A431細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
Mel-624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK81細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞
578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME1細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞、HT 29細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
SKUT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞、HOK細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞
PL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、NTera2 cl.D1細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞
EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
OCLY8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞
MuM-2B epithelioid cells人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞系
Hs-578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN 60細(xì)胞、P3-Jiyoye細(xì)胞、UMR-106細(xì)胞
GP2d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、Pan02細(xì)胞
SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMOS2G64C10細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、CL-40細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
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