"HEC-251 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料:子宮內(nèi)膜癌;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關產(chǎn)品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞
OCILY3細胞系相關產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
ROS17/28細胞系相關產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞
細胞生長:貼壁
HEC-251 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
SUM 159PT細胞系相關產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
Eca 109細胞系相關產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
Hepa1-6細胞系相關產(chǎn)品:Dx5細胞、CATH-a細胞、SAS細胞
A375-SM細胞系相關產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
WM115-mel細胞系相關產(chǎn)品:L-Wnt3A細胞、SK-MES1細胞、Pt K1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEC-251 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
TALL-104細胞系相關產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
HT115細胞系相關產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
RKO-AS45-1細胞系相關產(chǎn)品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
PAMC82細胞系相關產(chǎn)品:mousepodocyte細胞、RIN14B細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞
MCA 38細胞系相關產(chǎn)品:MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
8226細胞系相關產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
MMVECs細胞系相關產(chǎn)品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
GA-10 clone 4細胞系相關產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
MC-3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品:NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品:SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
HEC-251 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系
T47D:A細胞系相關產(chǎn)品:PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
HT 1376.T細胞系相關產(chǎn)品:U138細胞、hADSCs細胞、OVCA432細胞
B 95.8細胞系相關產(chǎn)品:NS20Y細胞、KBM5細胞、HFE-145細胞
NCI-Hut 125細胞系相關產(chǎn)品:R1800[RA]細胞、NMCG-1細胞、Strain V細胞
EFM192B細胞系相關產(chǎn)品:COLO-394細胞、NCI-H2227細胞、Helacyton gartleri細胞
U251MG細胞系相關產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
U251MG細胞系相關產(chǎn)品:3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
CFSC-8B細胞系相關產(chǎn)品:L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
Med 283細胞系相關產(chǎn)品:MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
MX-1細胞系相關產(chǎn)品:HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
OCILY7細胞系相關產(chǎn)品:SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
HCC-366細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
RS4-11細胞系相關產(chǎn)品:H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
NFS60細胞系相關產(chǎn)品:HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
MOLT-4細胞系相關產(chǎn)品:HEL92.1.7細胞、RGC-5細胞、SNU668細胞
NHA細胞系相關產(chǎn)品:MPP-89細胞、CNE細胞、NIE 115細胞
MDAMB435細胞系相關產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞
CCRF SB細胞系相關產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
HConEpic細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
HO-8910PM細胞系相關產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
Me Wo細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
BSC40細胞系相關產(chǎn)品:J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞
YES2細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞
SAS細胞系相關產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
NCI-H2330細胞系相關產(chǎn)品:SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
B16BL6細胞系相關產(chǎn)品:HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
Hs739T細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
IMCD-3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2009細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、LIM 1215細胞
MM6細胞系相關產(chǎn)品:Kit225細胞、Rabbit Kidney 13細胞、C3A細胞
SKCO-1細胞系相關產(chǎn)品:FAT細胞、EU-3細胞、293GP細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
CPA47細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
UM-UC-14細胞系相關產(chǎn)品:CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
SW-579細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
NCI-H358細胞系相關產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
KY-270細胞系相關產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
786-0WT細胞系相關產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞
SUM 159細胞系相關產(chǎn)品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
FHCRC subclone 11細胞系相關產(chǎn)品:3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞
RCC23細胞系相關產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
PBL細胞系相關產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
SW-948細胞系相關產(chǎn)品:SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品:H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
ROS 17/2.8細胞系相關產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
RBE4細胞系相關產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞系相關產(chǎn)品:H128細胞、HASMC細胞、NCI-H1299細胞
HEC-251 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關產(chǎn)品:A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
Scott細胞系相關產(chǎn)品:GOS3細胞、LPC-H12細胞、H1355細胞
Hs 737.T細胞系相關產(chǎn)品:293 F細胞、N9細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
RKO-AS45-1細胞系相關產(chǎn)品:HCC0827細胞、MARC-145細胞、LC1-Sq細胞
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關鍵字: HEC-251 epithelioid cells人子宮內(nèi)膜癌細胞系
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