"PZ-HPV-7 epithelioid cells人前列腺上皮細胞系
細胞背景資料:前列腺上皮細胞;HPV18轉化;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
C-33A細胞系相關產品:NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
D-341細胞系相關產品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
BEL-7404細胞系相關產品:CO115細胞、RPMI.8226細胞、High5細胞
細胞生長:貼壁
PZ-HPV-7 epithelioid cells人前列腺上皮細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HCC1954-BL細胞系相關產品:HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
HCC-1359細胞系相關產品:SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關產品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
NH-6細胞系相關產品:SKNBE-2細胞、HS0578T細胞、SK-MES1細胞
Ly18細胞系相關產品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PZ-HPV-7 epithelioid cells人前列腺上皮細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
LM(TK-)細胞系相關產品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
SUM-102細胞系相關產品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
RBE4細胞系相關產品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
NALM-6細胞系相關產品:RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關產品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細胞系相關產品:ACC2細胞、SK-RC-42細胞、SKMEL1細胞
LS-411N細胞系相關產品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞
ATN1細胞系相關產品:NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞
PZ-HPV-7 epithelioid cells人前列腺上皮細胞系
253JB-V細胞系相關產品:OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
IBRS-2細胞系相關產品:Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞
GM346細胞系相關產品:LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
RPMI-8402細胞系相關產品:SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
SW-954細胞系相關產品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
Farage Original Line細胞系相關產品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
Farage Original Line細胞系相關產品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
NCIH2122細胞系相關產品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
NCIH727細胞系相關產品:NCI-N87細胞、TN5B14細胞、SW1573細胞
OCI-AML-5細胞系相關產品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
OUMS-27細胞系相關產品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
SCC7細胞系相關產品:Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
RC-2細胞系相關產品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
H510細胞系相關產品:OCI-LY-1細胞、BEL7404細胞、IMR-90細胞
OCI AML3細胞系相關產品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
NCI-1155細胞系相關產品:GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
OVCA8細胞系相關產品:GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
MNNG細胞系相關產品:I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
HL 60細胞系相關產品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
Caki2細胞系相關產品:BE2C細胞、OKT 3細胞、CAL-78細胞
HELA-GFP細胞系相關產品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
OCI-Ly01細胞系相關產品:Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
H69細胞系相關產品:KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
COLO 320細胞系相關產品:THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關產品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
OE19細胞系相關產品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
NCIH2106細胞系相關產品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
HIT T-15細胞系相關產品:CORL23細胞、SGC 7901細胞、SK RC 20細胞
H647細胞系相關產品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
IOSE-29細胞系相關產品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
NPA-87細胞系相關產品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞
ABE8.1/2細胞系相關產品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
PANC-02-03細胞系相關產品:HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
OCIAML3細胞系相關產品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
Rat Lung-65細胞系相關產品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
SkChA-1細胞系相關產品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
OB2細胞系相關產品:Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
NCI747細胞系相關產品:N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
786O細胞系相關產品:OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
NCI-H1563細胞系相關產品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
LS174細胞系相關產品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
CEMC7細胞系相關產品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
CL1.0細胞系相關產品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
SPC-A1細胞系相關產品:H548細胞、NCIH1793細胞、HMEC-1細胞
ARIP細胞系相關產品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
NCI-H345細胞系相關產品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞
BT 20細胞系相關產品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
KM933細胞系相關產品:Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
SUDHL8細胞系相關產品:OCI Ly19細胞、N1E115細胞、GM05887細胞
H-157細胞系相關產品:U266 B1細胞、NCI-H1876細胞、Panc10.05細胞
VeroE6細胞系相關產品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞
PZ-HPV-7 epithelioid cells人前列腺上皮細胞系
RH-35細胞系相關產品:H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
MKN 45細胞系相關產品:hRPTC細胞、IMR-90細胞、CEM-C7細胞
HME1細胞系相關產品:MC 116細胞、H-1341細胞、SCC-4細胞
SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、GM2132細胞、SU-DHL-5細胞
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關鍵字: PZ-HPV-7 epithelioid cells人前列腺上皮細胞系
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