"P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells細(xì)胞、alpha TC1-6細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
C-33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細(xì)胞、293c18細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說(shuō)明書部分
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
HNSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCASMC細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞、HEL細(xì)胞
Hs 636.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO-27細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞、PAa細(xì)胞
HCC202細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM1細(xì)胞、WEHI 164 TC細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞
SK-MEL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY-1細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞
3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞、Line 207細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
HConEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細(xì)胞、KP-N-RT細(xì)胞、NCIH929細(xì)胞
OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞
P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
CEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞
ACHN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV 29細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞
UM-UC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細(xì)胞、YT細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞
EB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-M2細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞、SUD6細(xì)胞
ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞
USMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT7細(xì)胞、Hs 840.T細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞
HCC-2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：746T細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞、253JBV細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
MUTZ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞、HITT15細(xì)胞
H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
SKNBE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細(xì)胞、ECV細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL19細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、PF382細(xì)胞
HMO6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG 108-15細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞、H-378細(xì)胞
HCFB（HCF）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
MV4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細(xì)胞、K1細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞
ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
U 138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞
H-2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf21細(xì)胞、KMB17細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞
KATO 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WTRL1細(xì)胞、L929細(xì)胞、HCC1438細(xì)胞
HCC-1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High 5細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞、OCI-Ly8細(xì)胞
PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞、NCIH1623細(xì)胞
HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
WM-239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daudi細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞
A375mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS-1細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞、JHH2細(xì)胞
Bat lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm細(xì)胞、SHI1細(xì)胞、H-187細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞
CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
P3X63Ag8 epithelioid cells小鼠骨髓瘤細(xì)胞系
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
HCE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-A細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
HCC-1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、Hs683細(xì)胞
HCC1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE280細(xì)胞、P116細(xì)胞、L132細(xì)胞
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