"FO [Mouse myeloma] epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞 RKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC(Human Schwann)細胞 SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞 細胞生長:貼壁 FO [Mouse myeloma] epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞 JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞 SUM 190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞 QBC(939)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞 OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 FO [Mouse myeloma] epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞 KPL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1417細胞、SW626細胞、BMDC細胞 YH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞 TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞 L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞 NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞 LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞 Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞 LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞 SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞 FO [Mouse myeloma] epithelioid cells小鼠骨髓瘤細胞系 SF-763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細胞、RH8994細胞、L cell line細胞 SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞 MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 ESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞 OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞 H2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞 CHO K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 78細胞、NCIH1623細胞、NCI-H82細胞 C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞 B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞 MARC145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRH-0201細胞、IPLB-SF-21-AE細胞、HCC2157細胞 OVCA 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞 RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞 Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞 hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞 NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞 SKNMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞 UPCI-SCC-090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細胞、R3/1細胞、OVMANA細胞 HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞 COLO206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6-M1細胞、H-II-E-C3細胞、SU-DHL-16細胞 H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞 hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞 Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞 HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K422細胞、OK細胞、H-1694細胞 GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞 BRL 3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK細胞、UO.31細胞、HCC1954BL細胞 ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 HS-766-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細胞、COLO 394細胞、ONS-76細胞 HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞 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