"HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:盲腸腺癌;男性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞 DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞 CTLA4 Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1-sq細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng),營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá),又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小,不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國(guó)外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁,一般來(lái)講,對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬(wàn)古霉素等完全不敏感;對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用,所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞 U266B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞 HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞 LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞 MDA436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 LU165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞 A-375SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCa/16A3-F細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞、NR8383細(xì)胞 Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞 MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞 MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞 H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞 WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞 IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞 TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞 Pa017C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA802細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞、Li-7細(xì)胞 HCe-8693 epithelioid cells人盲腸腺癌細(xì)胞系 Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞 KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細(xì)胞、COV362細(xì)胞、SNU216細(xì)胞 SW260細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞 JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞 SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞 RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞 RF/6A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細(xì)胞、RGM1細(xì)胞、LU65細(xì)胞 HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞 Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞 SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞 HRGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-18細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞 SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞 H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞 QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞 CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞 AK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、HGMC細(xì)胞、TE-13細(xì)胞 SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞 373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞 HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞 PC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1細(xì)胞、HME-1細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞 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