"U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：骨肉瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
細胞生長：貼壁
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
NIH:OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞
HHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細胞、NCI-H1963細胞、LAD2細胞
HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
OB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細胞、OCI/AML4細胞、A2780細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
LC2/Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細胞、McG-1細胞、Hep II細胞
SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細胞系
CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞
SUSM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
P30/OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細胞、LCD細胞、PAEC細胞
NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
MDCK-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細胞、MN-60細胞、HCC94細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
BALB/c 3T3 clone A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細胞、SUM-159細胞、H-1573細胞
E.L.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細胞、HEL299細胞、SVHUC細胞
SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
THLE-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細胞、BI-Mel細胞、SVGp12細胞
NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞
Hs-578-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞
RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 266-4細胞、H-2195細胞、CCD-112 CoN細胞
PANC-02-03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細胞、MSTO211H細胞、MeWo細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
MX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、N-2a細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
Rabbit Kidney 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1650細胞、A2780CP70細胞、SK-N-BE2C細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
HUVEC-C[HUVEC]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細胞、M-07e細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞
NBL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
NCI-H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細胞、OVCAR.4細胞、NTera2/D1細胞
RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
16-HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
PGBE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細胞、Clone 15 HL-60細胞、C6661細胞
L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
OCILY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
KHYG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細胞系
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細胞、PLC PRF 5細胞、NCI522細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MM1S細胞、BT549細胞
LC-2/ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、BC-021細胞、H-2171細胞
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