"U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：骨肉瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話，這個細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法：開始細(xì)胞傳代前，仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細(xì)胞(單層細(xì)胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細(xì)胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細(xì)胞，挑選生長狀態(tài)良好，細(xì)胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細(xì)胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞
NIH:OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Super Tube細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、IMR32細(xì)胞
HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞
HCC-2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細(xì)胞、N-9細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細(xì)胞、H6c7細(xì)胞、HANK細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
OB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lieming Xu-2細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞、A2780細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞
WPE-int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細(xì)胞、DMS-53細(xì)胞、BIC細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 10細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細(xì)胞系
CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-HN13細(xì)胞、LCD細(xì)胞、PAEC細(xì)胞
NR8383.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞
Porcine Kidney-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801C細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
E.L.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL9217細(xì)胞、HEL299細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞
SK-LMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細(xì)胞、MDCC-MSB-1細(xì)胞、NCI-SNU-1細(xì)胞
TK10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY70細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
NCI-SNU-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞、THC-8307細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞
NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞
Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2196細(xì)胞、OKa-C-1細(xì)胞、H-2228細(xì)胞
RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞
PANC-02-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、MeWo細(xì)胞
CHP100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞、PLB985細(xì)胞
MX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
CEMx721.174.T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細(xì)胞、TE-13細(xì)胞、2BS細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
Rabbit Kidney 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1650細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞、SK-N-BE2C細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞
HDLM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-115細(xì)胞、HIC細(xì)胞、Duke University 4475細(xì)胞
HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
NBL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMRC-2細(xì)胞、Simpson細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
MA-782細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞
OCILY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
KHYG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：no-11細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、P30OHK細(xì)胞
MKN7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 1細(xì)胞、HS-445細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞
U2OS epithelioid cells人骨肉瘤細(xì)胞系
HaCaT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、NCI522細(xì)胞
HGBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BT549細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細(xì)胞、BC-021細(xì)胞、H-2171細(xì)胞
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