"FRhK-4 epithelioid cells恒河猴胚腎細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:胚胎;腎;自發(fā)永生;雌性 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞 RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞 SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 FRhK-4 epithelioid cells恒河猴胚腎細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞 Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H211細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞、bEnd.3[BEND3]細(xì)胞 HCT.116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-Rb 50細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞 JF305細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細(xì)胞、HT22細(xì)胞、HTh74細(xì)胞 SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 FRhK-4 epithelioid cells恒河猴胚腎細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞 526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞 C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細(xì)胞、HCT-15細(xì)胞、MDA435細(xì)胞 Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞 JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞 GM02132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞 NW-MEL-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞 WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞 B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞 NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞 FRhK-4 epithelioid cells恒河猴胚腎細(xì)胞系 MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞 KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞 WERI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細(xì)胞、AHH1細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞 IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞 JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞 CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞 CL11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、HL7702細(xì)胞 ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞 GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞 CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞 Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞 ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞 PA-TU-8988S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2286細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞 CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞 OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞 8305C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞、SK-MEL2細(xì)胞 B16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-08.13細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞 CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞 SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞 REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞 Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞 HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞 HS940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細(xì)胞、Anip-973細(xì)胞、A-9細(xì)胞 GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞 WRL 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞 ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞 Hs870T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞 H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細(xì)胞、L cells細(xì)胞、EL 4細(xì)胞 UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞 HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞 RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞 P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞 HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞 MEG-01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞 H-865細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5細(xì)胞、A20細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞 MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞 MLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞 QBC-939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞 NCIH1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-T1細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞 YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞 PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞 H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞 LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞 DoTc2-4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS-751細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞、SG231細(xì)胞 COS-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞、TE-9細(xì)胞 CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞 GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細(xì)胞、PL-5細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞 NCI-H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL 1細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞、KG-1細(xì)胞 JURKAT E-6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、Balb/c3T3細(xì)胞 FRhK-4 epithelioid cells恒河猴胚腎細(xì)胞系 SuDHL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.Bst細(xì)胞、LS-411細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞 NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、293E細(xì)胞、H-23細(xì)胞 CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-929細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞 C918細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細(xì)胞、CL11細(xì)胞、HPF細(xì)胞 "
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