"NRK epithelioid cells大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：腎；自發(fā)永生；Osborne-Mendel
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞
J 774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細(xì)胞、SKCol1細(xì)胞、KBM-5細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
NRK epithelioid cells大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過可視法對(duì)其進(jìn)行檢測，而且它對(duì)細(xì)胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁，一般來講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MZ-CRC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細(xì)胞、KM933細(xì)胞、SUM 102細(xì)胞
HCT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細(xì)胞、CNE1細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
L615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132C細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NRK epithelioid cells大鼠腎細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞
J82 COT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-1細(xì)胞、Namalva細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞
SW.620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-215細(xì)胞、MCCAR細(xì)胞、SK-NMC細(xì)胞
H748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細(xì)胞、H-2009細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞
MHCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0095細(xì)胞、H2110細(xì)胞、SNU-719細(xì)胞
LS513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly1細(xì)胞、A-10細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞
NSC-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMK細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
NRK epithelioid cells大鼠腎細(xì)胞系
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
Leukemia 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞
NS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB 106細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞、KYSE-140細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
NCI-H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ku812細(xì)胞、P30 OHK細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞
OCI-AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-DZ細(xì)胞、MC9細(xì)胞、SW 837細(xì)胞
H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-13細(xì)胞、H-2405細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細(xì)胞、HFF1細(xì)胞、8505C細(xì)胞
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞
P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞
TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A20細(xì)胞、ECC-1細(xì)胞、SC細(xì)胞
C 643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細(xì)胞、HTh74細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
SW 1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2817細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞、MDA231細(xì)胞
NCI-H1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞、SKRC-42細(xì)胞
SK-N-DZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-1847細(xì)胞、EC109細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞
SK-MES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細(xì)胞、MCF7-CTRL細(xì)胞、MB468細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
SKG-3a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞
SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞
HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞
KYSE-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞、SW 620細(xì)胞
C81-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB 6細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞
SkChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞
38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
HEp-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-E6細(xì)胞、HCC38細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞
K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞
RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞
HSC-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細(xì)胞、Co 205細(xì)胞、HKC細(xì)胞
COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞
DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
HuT 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞
Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細(xì)胞、NB.4細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞
NRK epithelioid cells大鼠腎細(xì)胞系
DITNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES-1細(xì)胞、LU165細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、VB細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
ATN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、CL 1-5細(xì)胞
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