"PK-15 epithelioid cells豬腎細胞系
細胞背景資料：PK-１５細胞建系于１９５５（Stice,E）。是PK-１a細胞的克隆系。該細胞系可用于多種病毒的增值及特性研究。另外，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，PK-１５細胞內(nèi)有C-型病毒顆粒存在，是研究C-型病毒的材料。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
KPNRTBM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞
RCC23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
細胞生長：貼壁
PK-15 epithelioid cells豬腎細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
hTERTHME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
BJ [Human fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細胞、PGBE1細胞、JCA-1細胞
D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
EJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa-RG細胞、SNT8細胞、CORL105細胞
SUPB15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細胞、HRPEpiC細胞、A 2058細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
PK-15 epithelioid cells豬腎細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
HS-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
HPC-Y5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131A細胞、H1694細胞、IEC 6細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
NCI-SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
IPLB-SF-21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL24細胞、SCC154細胞、JC細胞
MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
PK-15 epithelioid cells豬腎細胞系
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
COLO 320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
VB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
HCC-827細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞
Ca759細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
SKRC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2342細胞、JOSK-M細胞、SUM 52細胞
DMS-153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞
MV-4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
RL95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
1.1B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-18細胞、GM637A細胞、Human Kidney-2細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
HT-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
G-402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-MMT-1細胞、NCI-H2141細胞、MGH-U1 (EJ)細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
D283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
T-HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-119細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、ROS17/2.8細胞
HCC1954 BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、HPC-Y5細胞、SW 900細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
H-1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-13細胞、IOSE 80細胞、U343MG細胞
COLO394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
A10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
PK-15 epithelioid cells豬腎細胞系
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、U-343細胞、NUGC-4細胞
OVCAR.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-446細胞、L-132細胞、NT2D1細胞
H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 2細胞、CCD 1112SK細胞、Bowes melanoma cells細胞
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