"NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝臟組織,表達(dá)H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。 hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞 H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞 U138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ-1細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞、EC-9706細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-78細(xì)胞、MV411細(xì)胞、HuT 78細(xì)胞 CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞 HFTF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞 HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞 HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。 H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞 Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞 Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞 H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞 FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞 NCTC929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW-42細(xì)胞、GM07404細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞 GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞 F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-90細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞、BHK21細(xì)胞 RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞 NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞 NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝細(xì)胞系 NMC-G1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細(xì)胞、HLCL9B10細(xì)胞、PanC1細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞 Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞 Hs27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K299細(xì)胞、OS-732細(xì)胞、HCC-44細(xì)胞 JB 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞、FC33細(xì)胞 TKB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細(xì)胞、GM05862細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞 KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞 SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞 T-CAM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞、H1993細(xì)胞 FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞 RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞 EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞 H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞 LI7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞、T173細(xì)胞 GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞 KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞 H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞 CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞 NCI747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N87細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞 MG-HU-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-32細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞、LTEPa2細(xì)胞 S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞 CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞 rRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H596細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞 Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF295細(xì)胞、HKBML細(xì)胞、HRVEC細(xì)胞 LM TK negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1088細(xì)胞、P3J細(xì)胞、HR1K細(xì)胞 BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞 SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞 293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞 COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞 OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞 UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞 HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞 MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞 Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞 IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞 Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞 SBC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞、RM-1細(xì)胞 RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞 KM12-SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B TK-細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、HLFa細(xì)胞 RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞 Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞 A72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL19細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、PF382細(xì)胞 MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞 H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞 OVCAR-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435 S細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞 Sp2/O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-AG 8.653細(xì)胞、OUMS-23細(xì)胞、SCC4細(xì)胞 L-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L02細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞 IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞 GTL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細(xì)胞、H-1341細(xì)胞、MBVP細(xì)胞 COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞 Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞 NCTC 1469 epithelioid cells小鼠正常肝細(xì)胞系 OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞 NCIH1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC1-SPG細(xì)胞、PL5細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞 NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞 HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細(xì)胞、C-32細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞 "
上海賓穗生物科技有限公司
聯(lián)系商家時(shí)請(qǐng)?zhí)峒癱hemicalbook,有助于交易順利完成!
上海賓穗生物