"C666-1 epithelioid cells人鼻咽癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 VM-CUB-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞、HOS(TE85)細(xì)胞 COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞 CL-34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA134細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Hep 3B細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 C666-1 epithelioid cells人鼻咽癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hi-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1438細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞 SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞 FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞 Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞 PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 C666-1 epithelioid cells人鼻咽癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! MPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞 NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞 WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞 COLO680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HSF-1細(xì)胞、SNU182細(xì)胞、LS411N細(xì)胞 HCC2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞 Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞 Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞 CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞 TJ905細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞 NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞 C666-1 epithelioid cells人鼻咽癌細(xì)胞系 HMC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML-2細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞 D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞 H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞 SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞 SU-DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr-TC細(xì)胞、PC3-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞 HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞 HSC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT125細(xì)胞、HEC251細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞 Hi-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1438細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞 Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞、H-1882細(xì)胞 H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞 MHCC 97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26 WT細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞、Colon38細(xì)胞 RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、H-735細(xì)胞 UACC893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-841細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞 IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞 UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞 SW 1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細(xì)胞、P-388細(xì)胞、LTPA細(xì)胞 MOLM-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-643細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞 SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞 HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞 BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞 ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞 A673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN1細(xì)胞、SHI-1細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞 H2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber H-35細(xì)胞、LP-1細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞 NCI-H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H441細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞 GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞 HO1-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞、YD15細(xì)胞 LLC-MK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞 HARA-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCCT1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞 IPEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細(xì)胞、CCRF/CEM/0細(xì)胞、SKNO1細(xì)胞 OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞 KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞 BaF3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV304細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、H-1437細(xì)胞 HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞 CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞 NR8383.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞 SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞 CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞 8305-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞 QGY-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細(xì)胞、CAL 12T細(xì)胞、U20S細(xì)胞 EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞 D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞 CCD-112 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞 MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞 184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞 SUM-190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1355細(xì)胞、FL62891細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞 RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞 HCC-2279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞、UO31細(xì)胞 RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞 OCI Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞、CESS細(xì)胞 R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞 MDST8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞 C666-1 epithelioid cells人鼻咽癌細(xì)胞系 OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞 PA12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R-1059-D細(xì)胞、COLO-829細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞 TE11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、SMA560細(xì)胞、LA 4細(xì)胞 WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、EBTr細(xì)胞 "
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