"KMB-17 epithelioid cells人二倍體細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
RT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
細胞生長：貼壁
KMB-17 epithelioid cells人二倍體細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２傳代
OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
BaF3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
SHI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KMB-17 epithelioid cells人二倍體細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
H-1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細胞、D-283 Med細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
KMB-17 epithelioid cells人二倍體細胞系
DOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM12878細胞、Nthy ori 3.1細胞、NB-19細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、H498細胞、H-847細胞
S3 HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 231細胞、MPVECs細胞、Melan-a細胞
NCIH929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251MG細胞、HuCCT-1細胞、MARC145細胞
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
ABE­8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
130-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
TE 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
H-2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
MCF10-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
HT 1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL 6細胞、HEK293-FT細胞、IALM細胞
2E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
Panc-05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞
GH 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
Karpas-422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 38細胞、T.T細胞、Caco-2/ATCC細胞
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU1細胞、GT38細胞、ARPE-19細胞
CW-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細胞、C-4 I細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
AK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞、HGMC細胞、TE-13細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
PA12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
HCT_116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
C3H10T1/2 clone8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-1細胞、MCF10A細胞、NCIH322細胞
MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
A2780CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
MSTO-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞
KMB-17 epithelioid cells人二倍體細胞系
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細胞、GOTO細胞、BNCL2細胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、WM-451Lu細胞、hMSC-BM細胞
HSCT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSECs細胞、NCI-HUT-460細胞、GLAG-66細胞
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