"Tu 212 epithelioid cells人喉癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 MM.1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞 NCI-H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 637細胞、NT2-D1細胞、PK13細胞 Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞 細胞生長:貼壁 Tu 212 epithelioid cells人喉癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代 SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞 RN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞 HCC1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-388細胞、CTLL-2細胞、NR8383.1細胞 SW-1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細胞、GTL 16細胞、RCK-8細胞 WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Tu 212 epithelioid cells人喉癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞 293GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞 Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞 MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞 LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞 NTERA2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞 T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞 H-1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-10細胞、Swiss 3T6細胞、SCC-25細胞 AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞 TE9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細胞、NCIH838細胞、RPMI-6666細胞 Tu 212 epithelioid cells人喉癌細胞系 HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞 Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞 SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞 NCI-SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞 OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞 MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞 MeSoTheliOma-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、SU-DHL-1細胞 MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞 U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞 HCC-2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞 TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞 V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞 LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞 OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞 HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞 KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞 MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞 HIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 600.T細胞、DoHH-2細胞、CCRF.CEM細胞 Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞 Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞 CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞 SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞 SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞 NCI-H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞 AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞 Wistar Institute, Susan Hayflick細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA1細胞、RPMI-1846細胞、JROECL 21細胞 SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞 SW-1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa/S3細胞、HEK293T/17細胞、DLD 1細胞 NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞 UM-UC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞 C1R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞 C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞 MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞 MCF10-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞 HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞 H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞 SU.86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞 KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞 B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞 SGC-7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841CoTr細胞、DHL5細胞、LLCPK1細胞 HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞 SKMel-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 207細胞、Hs 888.Lu細胞、A-498細胞 GM05887細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細胞、H-209細胞、ZR75_1細胞 WERI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞 CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞 P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞 NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞 Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 Tu 212 epithelioid cells人喉癌細胞系 HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞 K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細胞、DCS細胞、CEM/0細胞 MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細胞、Hs832T細胞、CEM細胞 Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、NE-1細胞 "
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