"MDBK epithelioid cells牛腎細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞 H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞 OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞 細胞生長:貼壁 MDBK epithelioid cells牛腎細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞 NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞 Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞 IEC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-EBNA細胞、COR-L23細胞、ME-180細胞 SW1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 MDBK epithelioid cells牛腎細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 MGECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBR-3細胞、Hs 611.T細胞、QBC(939)細胞 UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞 E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞 COLO 699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞 HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞 FHCRC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞 ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞 GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞 MDBK epithelioid cells牛腎細胞系 COLO394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞 AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞 H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞 GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞 143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞 NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞 NCI-H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞 DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞 OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞 RWPE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞、DMS 153細胞、SCLC21H細胞 RC13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細胞、BE2-C細胞、HSC5細胞 Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞 Panc-813細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞 SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞 LC-1Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細胞、Hs 281.T細胞、Ramos G6.C10細胞 CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞 KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞 G-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細胞、SNUC1細胞、Calu 6細胞 SV40-HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞 BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞 BC-022細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞 CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞 A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞 SMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞 Capan2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞 PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞 SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞 H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞 CCRF CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞 U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 HCC0070細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞 HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞 TSU-Pr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1568細胞、COLO-829細胞、R.K.13細胞 ME-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞 HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞 OC-316細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞 Calu3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞 KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞 OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞 HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞 SKMEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞 BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細胞、MOVAS-1細胞、PL 45細胞 J-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞 Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞 Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞 TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞 IGROV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細胞、GH3細胞、SW982細胞 KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞 MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞 MDBK epithelioid cells牛腎細胞系 NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞 DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Lens-124細胞、Tn-5細胞、WB-F344細胞 HN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA-1細胞、SVG(P12)細胞、GM0637細胞 CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、BT549細胞、8402細胞 "
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