"PE/CA-PJ34 (clone C12) epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 LAN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細胞、207細胞、CFPAC細胞 MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞 TO175T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞 細胞生長:貼壁 PE/CA-PJ34 (clone C12) epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2傳代 L 540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞 NCI-H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞 P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞 SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞 Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PE/CA-PJ34 (clone C12) epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細胞、hFOB1.19細胞、LICR-LON-HN6-R細胞 MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞 HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞 EST81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954細胞、WB-F344細胞、OVCAR.3細胞 Panc 08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細胞、HKF細胞、HSAS1細胞 H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞 NRK clone 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞 HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞 HuLEC-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞 HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞 PE/CA-PJ34 (clone C12) epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 LuCL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞 TCMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞 LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞 HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞 R3/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細胞、NK-10A細胞、HSC2細胞 H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞 H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞 Hs 606.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-16細胞、TM3細胞、HDSMC細胞 OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞 HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞 Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞 HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞 CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞 OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞 B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞 LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞 KMB17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Verda reno細胞、CNE-2Z細胞、801-D細胞 A-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞 Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞 MT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、SKNO-1細胞、RPTEC TERT1細胞 L-5178-Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞 FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 HC11 Mammary Epithelium細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞 IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞 MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞 CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞 SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞 H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞 MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞 VeroE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細胞、SF 767細胞、A-20細胞 kms 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hopkins-92細胞、293-EBNA1細胞、H-1155細胞 U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞 SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞 HL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細胞、KU-812F細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞 CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞 KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞 HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞 LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞 H-2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞 NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞 K422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞 Embryonic Bovine Tracheal cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細胞、HNE2細胞、DMS 153細胞 THPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞 HT-55細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞 SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞 H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞 H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞 HuT-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞 HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞 PE/CA-PJ34 (clone C12) epithelioid cells人口腔鱗狀細胞癌細胞系 IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞 CX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH7777細胞、SW 954細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞 M059K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細胞、COLO 320 HSR細胞、HPB-ALL細胞 HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、SuDHL 5細胞、UCLA RO-81-A-1細胞 "
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