"KNS-81 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 Hs839.T細胞系相關產(chǎn)品:SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞 UM-UC-3細胞系相關產(chǎn)品:16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞 OVCAR8/ADR細胞系相關產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞 細胞生長:貼壁 KNS-81 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:2傳代 MGC-803細胞系相關產(chǎn)品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞 U 138 MG細胞系相關產(chǎn)品:A375-MEL細胞、R-1059-D細胞、32D-Cl3細胞 RPMI7666細胞系相關產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞 HCC1833細胞系相關產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞 Bovine ENDometrial cells細胞系相關產(chǎn)品:N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 KNS-81 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 NU-GC-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI-460細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞 Hep 3B2.1-7細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞 BHT101細胞系相關產(chǎn)品:NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞 MT-4細胞系相關產(chǎn)品:HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞 AMC-HN8細胞系相關產(chǎn)品:Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞 Tu177細胞系相關產(chǎn)品:CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞 H-2591細胞系相關產(chǎn)品:HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞 CEMC1細胞系相關產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞 SCCVII細胞系相關產(chǎn)品:U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞 FM-88細胞系相關產(chǎn)品:KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞 KNS-81 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系 WSU-DLCL-2細胞系相關產(chǎn)品:UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞 RPMI-7951細胞系相關產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞 SUP T1細胞系相關產(chǎn)品:BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞 OLN93細胞系相關產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞 MCF 7B細胞系相關產(chǎn)品:J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞 NCI-H2066細胞系相關產(chǎn)品:Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞 NCI-H2066細胞系相關產(chǎn)品:Panc_08_13細胞、Hs606T細胞、3T3細胞 HGC-27細胞系相關產(chǎn)品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞 MFE280細胞系相關產(chǎn)品:EBC1細胞、MG-63細胞、BaF3細胞 NALM-6-M1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞 Li-7細胞系相關產(chǎn)品:NCTC clone 929細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、VM-CUB-I細胞 SK-RC 39細胞系相關產(chǎn)品:TE-15細胞、HT1080細胞、NCI.H23細胞 mousepodocyte細胞系相關產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞 C3H-10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞 C 6細胞系相關產(chǎn)品:3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞 MFE-296細胞系相關產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞 MM-1S細胞系相關產(chǎn)品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞 TGHAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 OVCAR 4細胞系相關產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞 Lu-165細胞系相關產(chǎn)品:HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞 P3 NS1 Ag4/1細胞系相關產(chǎn)品:OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞 NTera 2/cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:H-1155細胞、OVCAR432細胞、ssMCF-7細胞 OUMS-23細胞系相關產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞 HT55細胞系相關產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞 Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞 F-36P細胞系相關產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞 COLO 829細胞系相關產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞 HL 60細胞系相關產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞 FO [Mouse myeloma]細胞系相關產(chǎn)品:P31/Fujioka細胞、Colo16細胞、MHH-CALL-2細胞 DHL-2細胞系相關產(chǎn)品:Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞 TM4細胞系相關產(chǎn)品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞 HKBML細胞系相關產(chǎn)品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞 HCC2157細胞系相關產(chǎn)品:IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞 J774A1細胞系相關產(chǎn)品:H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞 OC-316細胞系相關產(chǎn)品:ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞 MCF7/WT細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞 Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關產(chǎn)品:BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞 Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關產(chǎn)品:XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞 Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關產(chǎn)品:XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞 Hopkins-92細胞系相關產(chǎn)品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞 B16 F1細胞系相關產(chǎn)品:JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞 PLMVEC細胞系相關產(chǎn)品:JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞 Sp2/0細胞系相關產(chǎn)品:H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞 NCI-H1703細胞系相關產(chǎn)品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞 293-F細胞系相關產(chǎn)品:PC3M-IE8細胞、JIII細胞、C8161細胞 138MG細胞系相關產(chǎn)品:TYKnu細胞、HEK293-EBNA1細胞、DrG細胞 P388D1細胞系相關產(chǎn)品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞 P388細胞系相關產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞 H-2291細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞 M 1細胞系相關產(chǎn)品:32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞 FRO 81-2細胞系相關產(chǎn)品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞 KNS-81 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系 WEHI231細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN6細胞、McA-RH 7777細胞、VMRC-RCZ細胞 BNCL2細胞系相關產(chǎn)品:H647細胞、H1793細胞、HCMEC(BL12-H)細胞 Ca761細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2170細胞、SCC-9細胞、Panc2.03細胞 BHT101細胞系相關產(chǎn)品:NBL-7細胞、MC57細胞、BT474細胞 "
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