"HFF epithelioid cells人正常皮膚細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 NCIH345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 738細胞、MT4細胞、Jurkat clone A3細胞 NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞 FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞 細胞生長:貼壁 HFF epithelioid cells人正常皮膚細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。 細胞傳代方法:1:5—1:7傳代 HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞 RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞 CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞 MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HFF epithelioid cells人正常皮膚細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:成纖維細胞 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞 Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞 IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 NCI-H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepaRG細胞、D-324 Med細胞、McA-RH7777細胞 Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞 H184A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:28SC細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞、Hs888 Lu細胞 SK RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-10細胞、NCI-BL2141細胞、H-322細胞 Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞 hTERT-HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-673細胞、COLO 320 HSR細胞、NL-20細胞 HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞 HFF epithelioid cells人正常皮膚細胞系 mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞 WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞 SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMEC1細胞、COR L279細胞、ES-2細胞 SNU-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞 Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞 Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞 HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞 MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞 Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞 H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞 PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞 NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞 HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞 HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞 CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞 CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞 K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞 PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞 NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞 MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞 WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞 HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞 MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞 SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞 HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細胞、Walker-256-TC細胞、SNU638細胞 BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞 U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞 SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞 RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞 LCLC103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細胞、OAC-P4C細胞、MDA-MB-134細胞 PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞 LS-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細胞、ABC1細胞、K1735細胞 M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞 SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞 EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞 LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞 ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞 SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞 SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞 Melan-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細胞、HNE1細胞、HPAF-2細胞 OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞 H4IIEC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、MM1-S細胞、HCC2108細胞 SBC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞 TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞 870細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞 WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞 GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞 Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞 HFF epithelioid cells人正常皮膚細胞系 SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞 U373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341細胞、SW-48細胞、PLCPRF5細胞 Hs_578t細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細胞、NH6細胞、C3H/10T1/2細胞 IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、DLD-1細胞、PLC-8024細胞 "
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