"TCCSUP epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞 SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞 MALME 3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A204細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 TCCSUP epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代,2-3天換液1次。 NCIH660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞、KAT5細(xì)胞 CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞 SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞 U-251MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞 Sc-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS 4;11細(xì)胞、SCI1細(xì)胞、D283MED細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 TCCSUP epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因為運(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞 HPAF/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細(xì)胞、PANC 813細(xì)胞、BSC-40細(xì)胞 NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞 C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞 Mahlavu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細(xì)胞、MB468細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞 RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞 NTERA2-cloneD1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL-261細(xì)胞、MB49細(xì)胞、SUNE 1細(xì)胞 P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞 H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞 CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞 TCCSUP epithelioid cells人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞系 AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞 Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞 HEK-293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6細(xì)胞、FTC-133細(xì)胞、COLO 320DM細(xì)胞 138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TYKnu細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞、DrG細(xì)胞 A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞 YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞 YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞 P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞 T24(ECV304)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞 U-373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞 GM03573A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 5.04細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞 CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞 NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞 AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞 SW1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEKO細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞 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Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞 OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞 RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞 B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞 KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞 BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞 NCTC 3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞、JAR細(xì)胞 GLC-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2C12細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞 HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞 DB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞 CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞 T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞 OVCAR420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SiHa細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞、SF767細(xì)胞 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