"RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma] epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞 C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞 COV-434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma] epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對于不需要長期凍存的細(xì)胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。 細(xì)胞傳代方法:1:4傳代,2-3天換液1次。 NCI-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞、A 253細(xì)胞 Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞 HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞 SKRC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM1細(xì)胞、HOCF細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞 PANC0504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN1細(xì)胞、HIT細(xì)胞、SK-MEL-24細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma] epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞 alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞 UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、L132細(xì)胞、SK MEL 5細(xì)胞 GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞 LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞 A-172 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞、MEC1細(xì)胞 SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞 NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞 IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞 MDA-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS(TE85)細(xì)胞、MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、OC 316細(xì)胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma] epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系 THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞 Panc 2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞 3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞 CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、BV-2細(xì)胞、GM03320細(xì)胞 LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞 SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞 SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞 P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞 Jurkat E6.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細(xì)胞、H2291細(xì)胞、NCI522細(xì)胞 2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293A細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞、NCM460細(xì)胞 CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞 SUM 102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H660細(xì)胞、BC-009細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞 H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞 DLD 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞 EBC-1/original細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-2細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞、AN-3細(xì)胞 OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞 ST-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 756細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞、JOSK-M細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細(xì)胞、P3X63Ag8細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞 COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞 COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞 RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞 HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞 MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞 SMA560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225 K6細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞 Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO-31細(xì)胞、MC-38細(xì)胞、NIH:OVCAR-8細(xì)胞 Okayama University Medical School-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-316細(xì)胞、H-2108細(xì)胞、ELD-1細(xì)胞 COLO679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞、SCH細(xì)胞 PG-4 (S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SB細(xì)胞、MCF7細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞 BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞 32D CL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H87細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞 B16 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細(xì)胞、End1/E6E7細(xì)胞、H889細(xì)胞 OVCAR.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞 HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞 NOMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O細(xì)胞、CII細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞 ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞 RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞 OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞 Dakiki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細(xì)胞、DU 145細(xì)胞、U031細(xì)胞 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細(xì)胞、QGP1細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞 SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞 H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細(xì)胞、NCI-H676細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞 KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞 Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞 SUP-B15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞、Hs 742.T細(xì)胞 RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞 MPC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細(xì)胞、MC 116細(xì)胞、H1355細(xì)胞 SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞 SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、TPC1細(xì)胞 RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma] epithelioid cells人胰腺癌細(xì)胞系 Nb 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3F442A細(xì)胞、A-549細(xì)胞、G401細(xì)胞 MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細(xì)胞、KLE細(xì)胞、MOPC細(xì)胞 BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細(xì)胞、MCF7ADR細(xì)胞、A-253細(xì)胞 UCD-MLA-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-900細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞 "
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