"Capan-2 epithelioid cells人胰腺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞 LIM-1215細胞系相關產(chǎn)品:PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞 AtT-20細胞系相關產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞 細胞生長:貼壁 Capan-2 epithelioid cells人胰腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。 SCC154細胞系相關產(chǎn)品:Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞 Madin Darby Canine Kidney細胞系相關產(chǎn)品:M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞 hTERT-HME-1細胞系相關產(chǎn)品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞 BHK細胞系相關產(chǎn)品:TEC細胞、I90細胞、H2085細胞 TOV-112D細胞系相關產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Capan-2 epithelioid cells人胰腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:多邊形 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 RASMC細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly8細胞、TPC-1細胞、WSU-DLCL-2細胞 HCC 38細胞系相關產(chǎn)品:NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞 A204細胞系相關產(chǎn)品:HuT 102細胞、KY-270細胞、TK10細胞 FD-LSC-1細胞系相關產(chǎn)品:DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞 Nakata-1細胞系相關產(chǎn)品:H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞 Fetal Human Colon細胞系相關產(chǎn)品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞 MN 60細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞 NBL-3細胞系相關產(chǎn)品:RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞 SW 1463細胞系相關產(chǎn)品:HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞 CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞 Capan-2 epithelioid cells人胰腺癌細胞系 BCaP 37細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞 hESC細胞系相關產(chǎn)品:BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞 H9c2(2-1)細胞系相關產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞 H-441細胞系相關產(chǎn)品:769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞 Bowes melanoma cells細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞 CEM C7細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞 CEM C7細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW 039細胞、A2008細胞、BeWo細胞 NCI-H220細胞系相關產(chǎn)品:HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞 DV-90細胞系相關產(chǎn)品:Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞 LS-411N細胞系相關產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞 B6Tert-1細胞系相關產(chǎn)品:CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞 IOSE80細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H69C細胞、Jurkat E6-1細胞、MGECs細胞 IR 983F細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞 Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關產(chǎn)品:Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞 SP-2細胞系相關產(chǎn)品:FBHE細胞、U-226AR1細胞、BNL 1ME A.7R.1細胞 MCF-7B細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞 HMCB細胞系相關產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細胞、MDCKII-WT細胞、NPC-TW 01細胞 KP-N-YN細胞系相關產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞 Renal Carcinoma細胞系相關產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細胞、H9c2細胞、Hs 888.T細胞 Mink細胞系相關產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞 Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品:NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞 National Medical Center-Glioma 1細胞系相關產(chǎn)品:HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞 COLO320 DM細胞系相關產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞 NCIH522細胞系相關產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞 PLA-801D細胞系相關產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞 EMT-6細胞系相關產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞 Hs-343-T細胞系相關產(chǎn)品:FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞 NCTC clone 1469細胞系相關產(chǎn)品:Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞 KU19-19細胞系相關產(chǎn)品:LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞 MB-49細胞系相關產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞 U251細胞系相關產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞 C666-1細胞系相關產(chǎn)品:AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞 IHC-ST1細胞系相關產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞 SU-DHL-2細胞系相關產(chǎn)品:KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞 Be-Wo細胞系相關產(chǎn)品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞 COLO-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞 OVCAR432細胞系相關產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞 Calu-6細胞系相關產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞 A549細胞系相關產(chǎn)品:D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞 A375細胞系相關產(chǎn)品:LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞 H3255細胞系相關產(chǎn)品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞 Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞 Granta519細胞系相關產(chǎn)品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞 MDA415細胞系相關產(chǎn)品:H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞 SACCLM細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞 YT細胞系相關產(chǎn)品:LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞 HS5細胞系相關產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞 H-1869細胞系相關產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞 T 84細胞系相關產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞 P3/X63/Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞 MDCK Type II細胞系相關產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞 Capan-2 epithelioid cells人胰腺癌細胞系 MHH-CALL2細胞系相關產(chǎn)品:D-283MED細胞、W133細胞、BE(2)-C細胞 RCSMC細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、EoL-1細胞、KYSE450細胞 BxPC-3細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-7666細胞、VE細胞、RPMI6666細胞 A204細胞系相關產(chǎn)品:HuT 102細胞、H1155細胞、NCI-460細胞 "
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