"HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
MV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細胞、Caco-2/BBe細胞、TGBC-11-TKB細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
細胞生長：貼壁
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２傳代
SK-LMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE1細胞、MDCC-MSB-1細胞、NCI-SNU-1細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
MDA134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞
Wien133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
RetroPack PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞
GM03569B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1819細胞、HCC1588細胞、MOLT 3細胞
Hs839T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
C518細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
KYSE410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、WPE-int細胞
NK-92.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
MCA 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeSoTheliOma-211H細胞、NSI/1-Ag4-1細胞、GC-1spg細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
NCI-H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL28細胞、L1210細胞、SCC-4細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
MeT-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-549細胞、SK-ES1細胞、PANC 327細胞
NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
RCM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
NCI-H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細胞、32D/cl3細胞、KAT-5細胞
NCI-H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
MDA-MB-435-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細胞、NTERA2D1細胞、Hs 737.T細胞
Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞
P3/NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-3細胞、GM 2132細胞、SHP-77細胞
HCV 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly19細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、OSRC2細胞
RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
NCIH1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
Michigan Cancer Foundation-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞
SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
Anglne細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞
MRC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞
Psi-2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
Pt K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly18細胞、PZ-HPV-7細胞、H2452細胞
NCI-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細胞、He La細胞、TE14細胞
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
BGC823細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12SM細胞、Hep G2/C3A細胞、MLMA細胞
HuP-T4 epithelioid cells人胰腺癌細胞系
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
Ect1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3-L1細胞、MEL-526細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
HEP3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細胞、L-6細胞、RGB細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、NCIH2030細胞、C-Lu-65細胞
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