"NCI-H841 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞 HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCD細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、293細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 NCI-H841 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進(jìn)展,細(xì)胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細(xì)胞實驗謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細(xì)胞實驗室必備儀器進(jìn)行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細(xì)胞毒性越小,越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細(xì)胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細(xì)胞,特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株,要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月,對于不需要長期凍存的細(xì)胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細(xì)胞實驗室必備儀器。離心機(jī):細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞,所以需要配置低速的常溫離心機(jī),對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材:細(xì)胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實驗室。 細(xì)胞傳代方法:1:3—1:5傳代, MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞 HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞 Hs839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞 RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞 Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H841 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:混合型生長 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。 MKN-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS 1598細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞、alpha-TC1-6細(xì)胞 L929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞 GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞 NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞 NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEpiC細(xì)胞、HRA19細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞 VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞 TE-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞 MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞 ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞 NCI-H841 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞 GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞 RPMI-2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-021細(xì)胞、NHLF細(xì)胞、H-1648細(xì)胞 T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞 SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞 V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞 MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞 P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞 SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞 MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞 SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞 MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞 BCAP37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞、GM00637細(xì)胞 TGW-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細(xì)胞、OCI Ly10細(xì)胞、TE-85細(xì)胞 COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞 SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞 SW-527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞 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149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞 CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞 OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞 H1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB.4細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞 KG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2M17細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞 2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞 LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞 CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞 Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞 MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞 SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞 P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1618細(xì)胞、NBLS細(xì)胞、TGW細(xì)胞 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