"NCI-H2066 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
WC00097細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0202細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞、SEM細(xì)胞
GM-637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細(xì)胞、CHAGOK1細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞
U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
NCI-H2066 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：每周換液２-３次
DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MyLa2059細(xì)胞、NS1-Ag4細(xì)胞、ARO81-1細(xì)胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-97細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞、WM-451Lu細(xì)胞
UCLA RO-81-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 EBNA細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞、SUDHL8細(xì)胞
DBTRG-05MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr細(xì)胞、HB611細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H2066 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：聚團(tuán)懸浮
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞
LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞
NCI-H2066 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
SVG p12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞、CAL78細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
HCC0044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞、VERO76細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
CTSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細(xì)胞、Nb2-11細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
NIHOVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細(xì)胞、H2052細(xì)胞、MC-116細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
SW 579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細(xì)胞、WM 115細(xì)胞、EPC細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
Panc04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92細(xì)胞、NF639細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞
MN-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien133細(xì)胞、H-838細(xì)胞、HCC1599細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞
HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞
SiHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細(xì)胞、HCT8細(xì)胞、A.704細(xì)胞
L 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP10-3細(xì)胞、NCI-SNU-5細(xì)胞、NCI-H2073細(xì)胞
NCI-H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H441細(xì)胞、GM03671細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞
NTera2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞、CoC1細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
L-5178-Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPE-int細(xì)胞、SW260細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
BT-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET1A細(xì)胞、Eph4 1424細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞
PaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera-2D1細(xì)胞、118MG細(xì)胞、OCILY19細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞
HNE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
I90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 13細(xì)胞、SW1463細(xì)胞、INS-1細(xì)胞
H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG/HOS細(xì)胞、AD293細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
P3/X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1954細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-250細(xì)胞、211H細(xì)胞、BE2C細(xì)胞
SK HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細(xì)胞、HTR8細(xì)胞、HTori 3細(xì)胞
SKNFI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞、WBF344細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
RT-BM 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細(xì)胞、SK MEL-28細(xì)胞、CemT4細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
RH35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606T細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞
PCI:SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細(xì)胞、NCI747細(xì)胞、A10細(xì)胞
REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞
751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞
P116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH-22a細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞、CHP 126細(xì)胞
NCI-H2066 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系
SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞
KG-1a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HVSMC細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEB細(xì)胞、HO8910細(xì)胞、AM38細(xì)胞
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