"NCI-H2227 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 EFM192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-394細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞 Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞 H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 NCI-H2227 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。 HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞 LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞 H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞 RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞 P3/ag細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECCL-1細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 NCI-H2227 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:該細(xì)胞既有懸浮生長(zhǎng),又有貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞 Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞 NCI-H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/ATCC細(xì)胞、NCI/ADRRES細(xì)胞、ARO 81-1細(xì)胞 CCRFCEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM-1S細(xì)胞、SR786細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞 WM239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320D細(xì)胞、SNU-423細(xì)胞、TU 686細(xì)胞 CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞 H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞 MOLP8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細(xì)胞、LX-2細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞 PC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞、SKN-SH細(xì)胞 N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞 NCI-H2227 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 NK10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu 80細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞 CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞 GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞、MB-49細(xì)胞 CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞 Adeno-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-LCD細(xì)胞、TSCC1細(xì)胞、8402細(xì)胞 LS174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細(xì)胞、33604細(xì)胞、H1838細(xì)胞 LS174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細(xì)胞、33604細(xì)胞、H1838細(xì)胞 MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞 NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞 COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞 Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04671細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞、CW2細(xì)胞 HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞 Huh 7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細(xì)胞、Lewis Lung Cancer細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞 H-2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf21細(xì)胞、KMB17細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞 293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞 SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞 JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞 NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞 A-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Raji細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞 MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞 H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞 U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞 C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞 HPAFII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞 BJA-B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞、TR146細(xì)胞 INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞 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